CD4+CD25+foxp3+调节性T细胞通过NKG2D增强急性髓性白血病中NK细胞毒性

摘要：

目的:CD4+CD25+foxp3+调节性T细胞在急性髓性白血病中调控NKG2D介导NK细胞毒性的研究。方法:免疫磁珠法分离急性髓性白血病（AML）和健康对照外周血NK细胞和CD4+CD25+细胞，分析foxp3与NKG2D表达，CD4+CD25+foxp3+细胞的比例与NK细胞的细胞毒作用相关性。Spearman法分析CD4+CD25+foxp3+细胞比例与NK细胞的细胞毒性和NGK2D相关性。foxp3过表达处理AML外周血淋巴细胞后，流式细胞术检测NKG2D，IFN-γ和CD107a表达，LDH法检测NK细胞毒性。GEPIA2数据库分析AML患者NKG2D和foxp3基因表达相关性，TCGA数据库分析AML转录组数据中与NKG2D表达高相关性基因。IL-2 （10 μg/mL） ，IL-15 （10 μg/mL）处理NK细胞24 h后，流式细胞术检测NKG2D和CD107a表达，酶联免疫反应法检测NK细胞分泌的IFN-γ，LDH法检测NK细胞毒性。采用t检验等方法统计分析组间差异及变量相关性。结果:与对照比较，AML组NK细胞中NKG2D表达（平均荧光强度MFI：942.25 ± 117.17比3245.28 ± 367.43）降低（P < 0.001）。foxp3表达与NKG2D呈正相关性（r = 0.590，P < 0.001），NKG2D表达百分数与外周血淋巴细胞中CD4+CD25+foxp3+细胞的比例呈正相关（r = 0.708，P = 0.002），AML患者外周血NK细胞活力也与CD4+CD25+foxp3+细胞的比例呈正相关（r = 0.655，P = 0.006）。与OE-NC比较，OE-foxp3组细胞中NKG2D的表达水平（MFI：2115.37 ± 269.53比914.28 ± 103.36）、杀伤能力（58.24 % ± 3.17%比24.18 % ± 2.35%）、NK细胞毒性评估指标CD107a （45.43% ± 1.28%比18.24% ± 1.49%）和IFN-γ水平（24.16 % ± 1.17%比16.28 % ± 0.95%）升高（P均< 0.001）。TCGA数据分析发现，NKG2D表达与CD3G、IL-3、IL-2、CD3E、IL-10、IL-17、IL-7R、IL-15、EZH2等基因相关性较高，流式细胞术检测发现，与对照比较，IL-2和IL-15处理后NK细胞的表面受体NKG2D和CD107a表达、IFN-γ水平、NK细胞毒性均升高。结论:AML外周血中，NK细胞表面受体NKG2D低于正常对照，其中CD4+CD25+foxp3+调节性T细胞通过IL-2和IL-15影响NKG2D表达进而调控NK细胞毒性。

关键词：急性髓性白血病、NK细胞、NKG2D、CD4+CD25+foxp3+、IL-2

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在线出版日期：2024-08-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：212-219