rs37973位点多态性对氟替卡松诱导的Raji和THP-1细胞中GLCCI1基因启动子活性影响

摘要：

目的:通过荧光素酶实验评价rs37973位点多态性对氟替卡松诱导条件下Raji和THP-1细胞中人糖皮质激素诱导转录因子1 （GLCCI1）基因启动子活性的影响。方法:生物信息学预测并调取人GLCCI1基因启动子，构建rs37973-G和rs37973-A对应的荧光素酶报告基因表达载体并转染细胞，转染后细胞再经1 nmol/L氟替卡松继续处理24 h，后检测不同处理细胞中荧光素酶活性。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD法。结果:成功获取人GLCCI1基因启动子并构建荧光素酶表达载体pGL3- pro （rs37973-G）和pGL3-pro （rs37973-A）。转染后48 h，与转染对照组比较，Raji和THP-1细胞中报告基因表达载体转染组细胞中荧光素酶活性（23.82±2.79比18.03±2.28，24.52±2.62比19.11±2.37）均升高，差异具有统计学意义（P均< 0.05）。与pGL3- pro （rs37973-G）- GLCCI1转染组比较，1 nmol/ L氟替卡松处理24 h能够分别增强转染后Raji和THP-1细胞中荧光素酶活性（30.05±5.23比18.03±2.28，31.12±4.69比19.11±2.37），差异具有统计学意义（P均< 0.05）。与pGL3-pro （rs37973-A）-GLCCI1转染组比较，1 nmol/ L氟替卡松处理24 h能够分别增强转染后Raji和THP-1细胞中荧光素酶活性（50.03±7.28比23.82±2.79，48.25±5.91比24.52±2.62），差异具有统计学意义（P均< 0.05）。与pGL3- pro （rs37973-G）- GLCCI1转染且经1 nmol/L氟替卡松处理24 h组比较，pGL3-pro （rs37973-A）- GLCCI1转染且经1 nmol/ L氟替卡松处理24 h组Raji和THP-1细胞中荧光素酶活性增强（50.03±7.28比31.02±5.23，48.25±5.91比31.12±4.69），差异具有统计学意义（P均< 0.05）。结论:rs37973位点突变能够影响Raji与THP-1细胞中GLCCI1基因启动子活性，且与rs37973-A比较，rs37973-G能够更明显降低氟替卡诱导的Raji和THP-1细胞内GLCCI1基因启动子活性。

关键词：GLCCI1、单核苷酸多态性、荧光素酶、rs37973、氟替卡松

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资助基金：浦东新区卫生健康委员会领先人才培养项目PRWL2020-08

在线出版日期：2023-03-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：353-359