沉默LncRNA MEG3调控miR-424-5p/FoxO1对氧化型低密度脂蛋白诱导的动脉粥样硬化的保护机制

摘要：

目的:探究LncRNA MEG3在动脉粥样硬化（AS）发展中的作用及潜在机制。方法:培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs），采用氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导建立内皮细胞损伤模型。ox-LDL干预HUVECs为ox-LDL组；分别用sh-NC、sh-MEG3、sh-MEG3和in- miR- 424-5p、sh-MEG3和oe-FoxO1转染后ox-LDL干预HUVECs设为ox-LDL+sh-NC组、ox-LDL+sh-MEG3组、ox-LDL+sh-MEG3+in-miR-424-5p组、ox-LDL+sh-MEG3+oe-FoxO1组；ox-LDL相同的溶剂处理HUVECs为对照。采用qRT-PCR法检测LncRNA MEG3、miR-424-5p和FoxO1 mRNA表达水平；采用CCK-8和EdU法检测细胞增殖；采用流式细胞术检测细胞凋亡；小管形成实验检测血管生成；Western blot法检测FoxO1蛋白、血管生成相关蛋白NOS3、VEGFA和CXCL12的水平；双荧光素酶实验检测LncRNA MEG3和miR-424-5p靶标关系；建立AS小鼠模型，油红O染色检测小鼠AS病变面积；伊文思蓝染色评估血管再内皮化程度。两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用SNK-q检验。结果:与对照比较，ox-LDL组LncRNA MEG3表达（2.35±0.24比1.03±0.04）、FoxO1 mRNA和蛋白水平及细胞凋亡率上升（P均< 0.05）；miR-424-5p表达（0.37±0.05比1.03±0.08）、细胞活力、EdU阳性细胞数、小管管型分枝数、NOS3、VEGFA和CXCL12蛋白水平均下降（P均< 0.05）。与ox-LDL+sh-NC组比较，ox-LDL+sh-MEG3组LncRNA MEG3表达、FoxO1 mRNA和蛋白水平及细胞凋亡率下降；miR-424-5p表达、细胞活力、EdU阳性细胞数、小管管型分枝数及NOS3、VEGFA和CXCL12蛋白水平均上升（P均< 0.05）。抑制miR-424-5p或过表达FoxO1可部分逆转LncRNA MEG3沉默对ox-LDL刺激HUVECs的影响（P < 0.05）。LncRNA MEG3通过miR-424-5p靶向调控FoxO1表达（P < 0.05）。在体内，AS小鼠颈主动脉中LncRNA MEG3、FoxO1 mRNA和蛋白表达升高，而miR-424-5p、NOS3、VEGFA和CXCL12蛋白表达下调；同时AS病变面积增加，血管再内皮化受到抑制（P < 0.05）。沉默LncRNA MEG3后可改善上述AS小鼠的典型特征。结论:沉默LncRNA MEG3通过调控miR-424-5p/FoxO1促进HUVECs增殖和血管生成，抑制细胞凋亡，减轻AS。

关键词：LncRNA MEG3、动脉粥样硬化、增殖、凋亡、血管生成

所属期刊栏目：12

资助基金：广东省佛山市科技攻关项目1920001000474

在线出版日期：2023-03-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：335-345