LncRNAAC130710 通过 miR-129-5P/WNT4 轴促进子宫内膜癌细胞增殖和上皮间质转化

摘要：

目的 探讨LncRNA AC130710通过miR-129-5P/WNT4轴对子宫内膜癌细胞(HEC-lA细胞)增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的影响及机制研究.方法 通过实时荧光定量PCR检测LncRNA AC130710、miR-129-5P和WNT4在子宫内膜癌细胞(HEC-1A细胞)和人子宫内膜上皮细胞(HEEC)中的表达.细胞分别转染(1)siRNANC、AC130710 siRNA、WNT4 siRNA;(2)inhibitor NC、miR-129-5P inhibitor;(3)pcDNA-3.1(+)+mimics NC、pcDNA-AC130710+mimics NC、pcDNA-3.1(+)+miR-129-5P mimics、pcDNA-AC130710+miR-129-5P mimics.MTT 实验检测 LncRNA AC130710、miR-129-5P 和 WNT4 的表达对 HEC-1A 细胞增殖能力的影响;Western blot 检测 LncRNA AC 130710、miR-129-5P 和 WNT4 的表达对 HEC-lA细胞凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2基因相关蛋白X(Bax)、剪切的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、cleaved caspase-9和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)表达的影响;Western blot 检测 LncRNA AC 130710、miR-129-5P 和 WNT4 的表达对 HEC-1A 细胞 EMT 的影响.miRanda和双荧光素酶报告基因实验分析LncRNA AC 130710和miR-129-5P之间的关系,TargetScan数据库分析miR-129-5P与WNT4的相关性,双荧光素酶报告基因检测miR-129-5P与 WNT4 的相互作用;RT-qPCR 法检测 LncRNA AC 130710 通过 miR-129-5P 对 WNT4 表达的影响.两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 与HEEC细胞比较,HEC-1A细胞中AC130710表达水平(1.86±0.21比0.85±0.06)、WNT4 表达水平(1.88±0.26 比 1.08±0.12)升高;HEC-1A 细胞中 miR-129-5P 表达水平(0.89±0.16比1.76±0.08)降低.与转染siRNANC比较,转染AC130710 siRNA细胞内 Bax、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、E-cadherin 蛋白相对表达水平[(1.37±0.14 比0.84±0.21),(1.08±0.16 比 0.37±0.07),(1.26±0.24 比 0.39±0.06),(1.87±0.17 比 1.32±0.26)]上升,Bcl-2、N-cadherin、Snail 和 Vimentin 蛋白相对表达水平[(0.38±0.08 比 1.18±0.14),(0.36±0.04 比 0.85±0.24),(0.35±0.09 比 1.12±0.18),(0.42±0.10 比 1.26±0.27)]下降;与转染 inhibitor NC 比较,转染 miR-129-5P inhibitor 细胞的 Bcl-2、N-cadherin、Snail 和 Vimentin蛋白相对表达水平[(0.98±0.07 比 0.65±0.08),(1.39±0.15 比 0.68±0.09),(0.95±0.08 比0.42±0.06),(1.16±0.16 比 0.54±0.02)]上升,Bax、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、E-cadherin蛋白相对表达水平[(0.27±0.09 比 0.85±0.13),(0.48±0.05 比 1.16±0.28),(0.52±0.14 比1.19±0.15),(0.43±0.09 比 1.08±0.26)]下降;与转染 siRNANC 比较,转染 WNT4 siRNA细胞的 Bcl-2、N-cadherin、Snail 和 Vimentin 蛋白相对表达水平[(0.23±0.08 比 0.84±0.12),(0.28±0.09 比 1.14±0.17),(0.42±0.23 比 1.06±0.15),(0.35±0.08 比 1.13±0.08)]降低,Bax、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、E-cadherin 蛋白相对表达水平[(0.96±0.12 比 0.42±0.08),(1.13±0.25 比 0.45±0.06),(1.54±0.23 比 0.72±0.12),(1.87±0.24 比 1.26±0.18)]上升.结论 LncRNA AC130710可通过miR-129-5P/WNT4轴调控子宫内膜癌HEC-lA细胞增殖、凋亡及EMT.

关键词：LncRNA、miR-129-5P、WNT4、HEC-1A、细胞增殖、EMT

所属期刊栏目：12

分类号：R734.2;R575.2;R329.25

在线出版日期：2022-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：206-214