miR-491-5p靶向调控SHOC2对食管鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

摘要：

目的 探讨miR-491-5p对食管鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及作用机制.方法 培养永生化食管上皮细胞株HET-1A和人食管癌细胞株EC109,EC9706,KYSE510,qRT-PCR检测细胞中miR-491-5p和富含亮氨酸重复蛋白SHOC2(SHOC2)mRNA水平.EC109细胞分为空白对照组、miR-491-5p组、miR-NC组、miR-491-5p+pcDNA-SHOC2组和miR-491-5p+pcDNA组,MTT检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western Blot法检测CyclinD1、Vimentin、E-cadherin以及MAPK/ERK信号通路相关蛋白水平.双荧光素酶报告基因实验验证miR-491-5p与SHOC2之间调控关系.两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用SNK-q检验.结果 食管鳞癌细胞EC109、EC9706和KYSE510中miR-491-5p表达水平低于HET-1A细胞(0.32±0.06、0.62±0.10、0.61±0.08比1.00±0.08),差异具有统计学意义(F=106.340,P<0.001);SHOC2 mRNA表达水平高于HET-1A细胞(2.85±0.16、1.73±0.10、1.45±0.06比1.02±0.09),差异具有统计学意义(F=464.949,P<0.001).miR-491-5p组EC109细胞培养72 h后的OD值、细胞迁移数、侵袭数及CyclinD1、Vimentin、p-MEK和p-ERK蛋白水平均低于miR-NC组(0.70±0.06比1.42±0.08,65.01±10.36比150.01±12.48,70.03±10.26比140.02±11.85,0.30±0.03比0.93±0.16,0.41±0.05比0.86±0.08,0.32±0.06比0.95±0.11,0.40±0.06比0.92±0.13),差异具有统计学意义(F=236.565、159.440、120.706、101.071、98.619、130.766、77.046,P均<0.001),E-cadherin蛋白水平高于miR-NC组(0.89±0.13比0.48±0.08),差异具有统计学意义(F=816.432,P<0.001).miR-491-5p在EC109细胞中负调控SHOC2表达,SHOC2过表达逆转了miR-491-5p过表达对EC109细胞增殖、迁移和侵袭及MAPK/ERK信号通路的影响.结论?miR-491-5p可抑制食管鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其作用机制可能与下调SHOC2表达抑制MAPK/ERK信号通路活性有关.

关键词：食管鳞癌、miR-491-5p、SHOC2、细胞增殖、细胞迁移、细胞侵袭

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在线出版日期：2020-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：333-339