miR-142-3p通过调控ELAVL1表达影响过氧化氢诱导的心肌细胞损伤的分子机制

摘要：

目的探讨微小RNA-142-3p(miR-142-3p)对过氧化氢诱导的心肌细胞损伤的影响及其作用机制.方法构建氧化应激损伤模型,以H9C2心肌细胞为研究对象,实验将心肌细胞转染后分为正常对照组、H2O2组、H2O2+miR-142-3p组、H2O2+miR阴性对照组、H2O2+si-ELAVL1组、H2O2+siRNA对照组、H2O2+miR-142-3p+pcDNA-ELAVL1组、H2O2+miR-142-3p+pcDNA组.分别采用qRT-PCR与Western Blot检测细胞中miR-142-3p与ELAVL1表达;检测各组活性氧(ROS)生成水平;MTT检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡.双荧光素酶报告实验验证miR-142-3p与ELAVL1的靶向作用.Western Blot检测细胞中Cleaved Caspase-3、STAT3、Caspase-3、p-STAT3蛋白表达.两组间比较采用两样本t检验;多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果H2O2组心肌细胞中miR-142-3p(0.26±0.06)、p-STAT3表达水平(0.36±0.04)、细胞存活率(61.73±6.48)﹪与正常对照组相比下降(P均<0.01),而ROS水平(1566.38±121.57)、细胞凋亡率(27.46±1.73)﹪、Cleaved Caspase-3(0.68±0.08)及ELAVL1表达水平(4.23±0.31)均升高(P均<0.01);双荧光素酶报告实验证实ELAVL1是miR-142-3p的靶基因;miR-142-3p过表达或沉默ELAVL1表达可明显促进心肌细胞存活、上调p-STAT3表达,而抑制细胞凋亡及Cleaved Caspase-3表达;ELAVL1过表达可逆转miR-142-3p对过氧化氢处理H9C2细胞的保护作用.结论miR-142-3p可通过抑制ELAVL1表达进而减轻过氧化氢诱导的心肌细胞损伤,其可能通过影响STAT3信号通路而保护心肌细胞.

关键词：miR-142-3p、ELAVL1、过氧化氢、心肌细胞

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在线出版日期：2019-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：135-143