硫化氢通过调控SIRT1抑制阿霉素诱导的H9c2细胞损伤

摘要：

目的 探讨硫化氢(H2S)对阿霉素(DOX)诱导的H9c2细胞损伤的影响及其作用机制.方法 H2S对DOX心肌毒性保护作用的实验分组为:对照组(Control组),5μmol/L DOX处理组(A组),5μmol/L DOX和400μmol/L NaHS共同处理组(B组),400μmol/L NaHS单独处理组(C组),5μmol/L DOX、400μmol/L NaHS和15μmol/L Sirtinol共同处理组(D组),15μmol/L Sirtinol单独处理组(E组).SIRT1是否参与H2S抗DOX心肌毒性作用机制的实验分组为:对照组(Control组),5μmol/L DOX处理组(F组),5μmol/L DOX和400μmol/L NaHS共同处理组(G组),5μmol/L DOX、400μmol/L NaHS和15μmol/L Sirtinol共同处理组(H组),15μmol/L Sirtinol单独处理组(I组).使用MTT法检测细胞活力;Elisa法检测细胞MDA以及SOD水平;DCFH-DA荧光探针法检测ROS水平;采用Western Blot法检测SIRT1蛋白表达.使用单因素方差分析法进行统计学分析.结果 NaHS预处理可抑制DOX导致的H9c2细胞活力下降:Control组,A组、B组、C组细胞活力分别为100﹪、(54.58±1.58)﹪、(85.05±4.31)﹪、(100.22±4.46)﹪(F=134.9,P<0.001).NaHS预处理可减弱DOX引起的H9c2细胞ROS、MDA水平的增加以及SOD水平的降低:Control组的ROS、MDA和SOD水平分别是100﹪、(34.18±1.56)μmol/g、(53.69±1.44)U/mg;A组的ROS、MDA和SOD水平分别是(174.90±12.65)﹪、(72.65±2.66)μmol/g、(31.80±2.05)U/mg;B组的ROS、MDA和SOD水平分别是(126.08±6.25)﹪、(44.59±1.92)μmol/g、(48.06±1.56)U/mg;C组的ROS、MDA和SOD水平分别是(91.86±1.66)﹪、(32.93±1.56)μmol/g、(55.93±1.58)U/mg(F=83.26,P<0.001;F=271.4,P<0.001;F=127.0,P<0.001).F组(6、12、24 h)H9c2细胞SIRT1蛋白表达水平分别是(0.45±0.03)、(0.27±0.02)、(0.25±0.03),较Control组(1.00±0.00)降低(F=611.1,P<0.001).本研究还发现,NaHS预处理H9c2细胞能阻止DOX引起的SIRT1蛋白表达下调:Control组、F组、G组、H组的SIRT1蛋白表达水平分别是(1.00±0.00)、(0.31±0.03)、(0.60±0.04)、(1.09±0.09)(F=123.4,P<0.001).SIRT1抑制剂Sirtinol预处理能明显逆转H2S对DOX诱导的H9c2细胞活力降低的抑制作用:Control组,F组、G组、H组、I组细胞活力分别为100﹪、(54.58±1.58)﹪、(85.37±3.62)﹪、(71.11±2.11)﹪、(97.53±1.45)﹪(F=238.2,P<0.001).Sirtinol预处理可明显逆转H2S对DOX导致的H9c2细胞ROS和MDA含量增加及SOD水平降低的抑制作用:Control组的ROS、MDA和SOD水平分别是100﹪、(35.84±2.22)μmol/g、(53.03±3.16)U/mg;F组的ROS、MDA和SOD水平分别是(184.6±11.33)﹪、(74.78±5.30)μmol/g、(29.26±0.85)U/mg;G组的ROS、MDA和SOD水平分别是(126.5±7.57)﹪、(41.95±3.43)μmol/g、(52.61±2.26)U/mg;H组的ROS、MDA和SOD水平分别是(174.7±5.50)﹪、(67.69±1.52)μmol/g、(35.33±1.95)U/mg,I组的ROS、MDA和SOD水平分别是(98.03±2.86)﹪、(37.66±2.49)μmol/g、51.14 U/mg(F=112.0,P<0.001;F=93.73,P<0.001;F=84.92,P<0.001).结论 H2S通过调控SIRT1抑制DOX诱导的H9c2细胞损伤.

关键词：硫化氢、阿霉素、SIRT1、H9c2细胞

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在线出版日期：2019-02-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：218-223