支架材料对棕色脂肪源性干细胞向起搏细胞诱导分化的影响

摘要：

目的 观察不同三维支架材料对棕色脂肪来源干细胞(BADSCs)诱导分化成起搏细胞的效果,为构建生物起搏器提供实验依据.方法 将培养7d的原代BADSCs分别种植到胶原海绵、明胶海绵和透明质酸水凝胶3种不同的材料中,在不同时间用光镜和扫描电镜观察细胞-支架复合体中细胞形态学的变化,免疫荧光染色检测心肌细胞、起搏细胞相关蛋白的表达.采用单因素方差分析.结果 细胞在3种支架上均能存活、增殖,LIVE/DEAD检测显示,培养3d的胶原海绵、明胶海绵和透明质酸水凝胶3种细胞-支架复合物死细胞率分别为(46.35±1.50)％、(47.00±1.60)％和(1.76±1.08)％,其中细胞在透明质酸水凝胶中死亡率最低,并且细胞-透明质酸水凝胶复合物可自发性地搏动,三组比较差异具有统计学意义(F=37.56,P＜0.05).培养至2周时,胶原海绵、明胶海绵和透明质酸水凝胶中Connexin45细胞阳性率分别为(10.67±1.25)％、(13.67±1.25)％和(21.00±1.60)％,差异有统计学意义(F=9.435,P＜ 0.01),HCN2细胞阳性率分别为(11.00±1.60)％、(14.00±2.16)％和(34.33±3.68)％,差异有统计学意义(F=17.52,P＜ 0.01),HCN4细胞阳性率分别为(18.67±2.05)％、(13.00±1.60)％和(66.00±2.94)％,差异有统计学意义(F=27.96,P＜0.01),Sr细胞阳性率分别为(13.00±1.63)％、(14.33±1.24)％和(75.33±3.30)％,差异有统计学意义(F=36.40,P＜0.01),水凝胶中Connexin45、HCN2、HCN4和Sr的细胞阳性率均高于胶原海绵和明胶海绵,差异均具有统计学意义(P＜ 0.05).结论 BADSCs在胶原海绵、明胶海绵和透明质酸水凝胶中均能很好地生长和分化,但透明质酸水凝胶更适用于组织工程化起搏器的构建.

关键词：脂肪源性干细胞、起搏细胞、支架材料、组织工程、起搏器

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资助基金：国家自然科学基金面上项目31170934,31271050

在线出版日期：2018-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：72-79