高剂量pSin慢病毒载体介导的转染对诱导性多能干细胞影响的研究

摘要：

目的 研究慢病毒载体pSin介导的基因修饰后的诱导性多能干细胞(iPS),细胞形态和传代的影响.方法 通过包装慢病毒pSin-GFP感染iPS,分为实验组(细胞与病毒滴度比例1∶200)和对照组(细胞与病毒滴度比例1∶1)感染人iPS,经过嘌呤霉素药物筛选获得单克隆,重复3次实验观察细胞形态学变化记录细胞每代克隆数,采用方差分析及t检验进行统计学分析数据结果,用免疫荧光和werstern检测iPS标志蛋白表达.结果 pSin-GFP病毒感染iPS后挑取24个单克隆细胞株,传十代后实验组(4.67±0.33)明显少于对照组(16.00±0.58)的细胞克隆数(t=17.00,P＜0.01),实验组细胞状态稳定并正常表达Oct-4、Sox2、SSEA-1、Nanog和Tra-1-60.结论 使用1∶200的高比例慢病毒载体pSin介导的基因修饰后的iPS可传代次数减少,形态学并未发生变化,其正常表达的干细胞标志性蛋白.

关键词：多能干细胞、慢病毒属、基因修饰

所属期刊栏目：7

分类号：R73;R97

在线出版日期：2017-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：125-130