高迁移率族蛋白B1/Toll样受体4信号通路在脓毒症大鼠致急性肺损伤中的作用研究

摘要：

目的 探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)信号通路对脓毒症导致的急性肺损伤大鼠的影响.方法 将60只清洁级雄性Sprague Dawley大鼠分为假手术组、脓毒症组和实验组,每组各20只.假手术组大鼠麻醉后开腹翻动肠道,随即关腹;脓毒症组和实验组行盲肠结扎穿孔(CLP)术后0.5 h于尾静脉分别注射等渗NaCl溶液(4 mL/kg)及抗HMGB1单克隆抗体(2 mg/kg).各组分别取10只用于观察大鼠CLP建模后7 d存活情况,其余大鼠于造模后24 h处死并留取肺组织标本.计算各组大鼠的肺损伤Smith评分,并比较各组大鼠HMGB1和TLR4阳性蛋白在肺组织中的表达水平.采用酶联免疫吸附测定检测各组大鼠肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、HMGB1和TLR4水平,计算每个巨噬细胞内微球蛋白数以比较各组大鼠肺泡巨噬细胞(AM)的吞噬功能,并采用Western-blotting法测定AM内HMGB1、TLR4蛋白表达水平.结果 假手术组大鼠建模后7 d全部存活,脓毒症组大鼠仅3只存活,实验组大鼠5只存活.各组大鼠间存活情况的比较,差异有统计学意义(χ2=10.833,P=0.004);且假手术组大鼠的存活情况明显优于脓毒症组与实验组大鼠(P均<0.017),而脓毒症组与实验组大鼠间存活情况比较,差异无统计学意义(P=0.120).假手术组、脓毒症组及实验组大鼠间肺组织损伤评分[(2.20±0.27)、(8.20±1.27)、(4.25±2.21)分,F=56.432,P<0.001],肺组织HMGB1阳性蛋白[(10.4±1.5)、(34.4±5.0)、(26.6±6.9),F=35.203,P=0.003]、TLR4阳性蛋白[(10.6±2.1)、(48.0±5.8)、(38.2±5.3),F=103.414,P=0.002],BALF中TNF-α[(19±4)、(45±4)、(35±4)μg/L,F=2.749,P<0.001]、IL-6[(56±19)、(86±15)、(70±19)μg/L,F=4.648,P=0.001]、HMGB1[(41±18)、(70±15)、(56±12)μg/L,F=7.254,P=0.002]、TLR4[(20.9±1.8)、(51.2±1.6)、(49.8±2.6)μg/L,F=3.978,P=0.035],AM的吞噬功能[(21.8±2.7)、(3.1±1.9)、(12.6±2.2)个,F=32.821,P=0.001]及AM中HMGB1蛋白[(11±3)、(40±15)、(24±13),F=7.253,P<0.001]、TLR4蛋白[(0.9±0.4)、(1.2±0.6)、(1.1±0.4),F=3.984,P=0.028]的比较,差异均有统计学意义.进一步两两比较发现,脓毒症组与实验组大鼠肺组织损伤评分,肺组织HMGB1阳性蛋白、TLR阳性蛋白表达水平,BALF中TNF-α、IL-6、HMGB1水平及AM中HMGB1蛋白表达水平均明显高于假手术组大鼠,且脓毒症组大鼠更高(P均<0.05);脓毒症组及实验组大鼠AM的吞噬功能均显著低于假手术组,且脓毒症组更低(P均<0.05);脓毒症组及实验组大鼠BALF中TLR4水平及AM中TLR4蛋白表达水平均显著高于假手术组(P均<0.05),但脓毒症组与实验组间上述指标的比较,差异均无统计学意义(P均>0.05).结论 通过抑制HMGB1/TLR4信号通路可以缓解脓毒症致肺损伤大鼠肺组织的炎症损伤,抑制炎症介质过度释放,并增强AM的细胞吞噬功能.

关键词：高迁移率族蛋白质类、Toll样受体4、脓毒症、急性肺损伤、大鼠

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资助基金：浙江省基础公益研究计划项目LGF18H150009

在线出版日期：2021-03-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：419-426