10.3877/cma.j.issn.1674-6880.2018.04.008
尿多酸肽通过调节caspase家族诱导多发性骨髓瘤细胞U266凋亡的实验研究
目的 探讨尿多酸肽抑制多发性骨髓瘤(MM)细胞株U266增值及其机制.方法 采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法计算不同尿多酸肽浓度(1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mg/g)对U266细胞生长的抑制率,Hoechst33258染色观察尿多酸肽作用后的细胞凋亡情况,Annexin-V/碘化丙啶(PI)检测尿多酸肽作用6、12、24 h后与对照组细胞(加细胞未加药物)的细胞凋亡率.使用Western-blotting法检测caspase 8、caspase 3及其激活物在U266细胞株经尿多酸肽(4 mg/g)作用6、12、24 h后的表达改变.结果 随着尿多酸肽浓度提高,U266细胞抑制率显著上升(F=17.276,P<0.001).经尿多酸肽作用后,Hoechst33258荧光染色提示细胞核浓集及出现凋亡小体.Annexin-V/PI分析显示,尿多酸肽处理6、12、24 h后细胞凋亡率显著高于对照组细胞[(5.53±0.28)%、(9.43±1.78)%、(21.50±2.45)%、(3.03±0.11)%,F=12.242,P<0.001].同时,随着尿多酸肽作用时间延长,pro-caspase 8、pro-caspase 3表达明显下降(F=18.241,P<0.001;F=4.924,P=0.005),而active-caspase 8、active-caspase 3表达明显上升(F=22.322,P<0.001;F=6.213,P=0.002).结论 尿多酸肽可抑制U266细胞增殖,且可能通过caspase凋亡途径在其中起主要作用.
尿多酸肽、U266、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶、多发性骨髓瘤、细胞凋亡
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浙江省卫计委创新人才资助计划项目1S21702;浙江中医药大学附属第一医院三鹰人才资助计划项目ZD01601
2018-09-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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