分枝杆菌噬菌体D29 LysinB/Holin真核表达载体的构建及杀菌试验

摘要：

目的:构建分枝杆菌噬菌体D29 LysinB/Holin融合蛋白真核表达载体，通过细胞感染模型研究其在胞内对结核分枝杆菌的杀伤效果。方法:构建原核重组质粒pET32a-LysinB并诱导表达，纯化蛋白后制备多克隆抗体；构建真核重组质粒pcDNA3.1(＋)-LysinB/Holin并转染进单核巨噬细胞RAW264.7，经制备的LysinB多克隆抗体进行表达鉴定后，建立细胞感染模型并通过抗酸染色和菌落计数检测LysinB/Holin融合蛋白的杀菌效果。结果:成功制备LysinB的多克隆抗体。重组质粒pcDNA3.1(＋)-LysinB/Holin在真核细胞中有效表达LysinB/Holin融合蛋白且对细胞无明显毒性。LysinB/Holin融合蛋白可有效杀伤胞内的结核分枝杆菌。结论:重组质粒pcDNA3.1(＋)-LysinB/Holin对胞内结核分枝杆菌有较好的杀伤效果，且对细胞无明显毒性，具有治疗结核病的潜能。

关键词：结核分枝杆菌、噬菌体D29、Lysin B、Holin

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资助基金：山东省自然科学基金面上项目ZR2021MH401;Natural Science Foundation of Shandong ProvinceZR2021MH401

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：74-80