人胎盘源间充质干细胞通过CD73/Nrf2途径抑制Th1细胞分泌TNF-α减轻急性移植物抗宿主病小鼠肝损伤机制研究

摘要：

目的:探究人胎盘源间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells，hPMSCs)通过CD73/核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，Nrf2)途径抑制CD4
＋IFN-γ
＋T(Th1)细胞分泌TNF-α减轻急性移植物抗宿主病(graft versus-host disease，GVHD)小鼠肝损伤的作用机制。
方法:流式细胞术分析GVHD小鼠外周血和肝组织中Th1细胞对TNF-α的表达以及CD4
＋IFN-γ
＋TNF-α
＋T(TNF-α
＋Th1)细胞上PD-1的表达水平。采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin，HE)染色、马松(Masson)染色和免疫荧光染色观察各组GVHD小鼠肝组织病理变化，并进一步用HE染色观察各组GVHD小鼠皮肤和肺组织病理变化。体外建立非条件性外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)向Th1细胞诱导方案，检测TNF-α
＋Th1细胞比例以及其Nrf2和磷酸化细胞核内核因子-κB(phosphorylated nuclear factor-kappa B，p-NF-κB)的平均荧光强度(mean fluorescence intensity，MFI)。
结果:与正常对照组相比，GVHD发病高峰组小鼠外周血和肝组织中TNF-α
＋Th1细胞比例和TNF-α
＋Th1细胞对PD-1的表达明显升高(
P<0.01)；hPMSCs干预可降低小鼠外周血和肝组织中TNF-α
＋Th1细胞比例(
P<0.001)，促进小鼠外周血和肝组织中TNF-α
＋Th1细胞对PD-1的表达(
P<0.01，
P<0.001)，然而shCD73对小鼠外周血和肝组织中TNF-α
＋Th1细胞的干预效果明显减弱(
P<0.05，
P<0.01)。肝组织病理学分析结果显示，肝脏中TNF-α
＋Th1细胞比例分别与Suzuki′s评分、胶原面积和α-SMA的MFI呈正相关(
P<0.001)。同样，皮肤和肺组织病理学分析结果也显示，外周血中TNF-α
＋Th1细胞比例分别与皮肤的Cetkovic-Cvrlje评分和肺的Qiao Shukai评分呈正相关(
P<0.001)。PBMCs活化实验也显示hPMSCs能下调TNF-α
＋Th1细胞比例(
P<0.01)，上调TNF-α
＋Th1细胞对PD-1的表达(
P<0.05)；进一步分析发现hPMSCs可增强TNF-α
＋Th1细胞中Nrf2的MFI(
P<0.05)，减弱p-NF-κB的MFI(
P<0.01)。
结论:hPMSCs可能通过CD73/Nrf2途径上调PD1的表达，抑制TNF-α
＋Th1细胞形成，进而减轻GVHD小鼠肝损伤。

关键词：人胎盘源间充质干细胞、Th1细胞、PD-1、CD73、Nrf2、NF-κB

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资助基金：国家自然科学基金32070781;山东省自然科学基金ZR2020MH166;National Natural Science Foundation of China32070781;Natural Science Foundation of Shandong ProvinceZR2020MH166

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：663-670