蛋白质磷酸酶4催化亚基调控乙型肝炎病毒X蛋白水平及生物学功能

摘要：

目的:探讨蛋白质磷酸酶4催化亚基(protein phosphatase 4 catalytic subunit，PP4C)对乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein，HBx)在蛋白质水平的调控及生物学功能的影响，为乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)相关性肝癌提供潜在治疗靶点。方法:通过免疫共沉淀(co-immunopreciptation，Co-IP)与GST pull-down试验验证HBx与PP4C在体内与体外的相互作用。采用Lipofectamine 3000试剂转染PP4C过表达真核质粒检测PP4C对HBx在蛋白质水平的影响，并用蛋白质合成抑制剂环己酮亚胺(cycloheximide，CHX)处理过表达PP4C的肝癌细胞，Western blot检测HBx半衰期变化。磷酸化试验检测PP4C对HBx磷酸化水平的影响。CCK8增殖、细胞划痕、Matrigel侵袭小室试验检测PP4C对HBx生物学功能的影响。结果:Co-IP与GST pull-down试验证实HBx与PP4C在肝癌细胞内存在相互作用，在体外也存在相互作用。肝癌细胞中过表达PP4C可提高HBx蛋白水平，并明显延长HBx半衰期。磷酸化试验证实在肝癌细胞中过表达PP4C可降低HBx丝氨酸磷酸化水平。PP4C过表达对肝癌细胞的增殖没有影响，但是促进肝癌细胞的迁移与侵袭能力。结论:HBx与PP4C的相互作用可提高HBx稳定性，最终促进肝癌细胞的迁移与侵袭，其机制与PP4C降低HBx丝氨酸磷酸化水平有关。本研究为发现HBx致病新机制提供理论依据，以PP4C和HBx蛋白相互作用为靶标，有望为HBV感染相关肝脏疾病的治疗提供有益思路。

关键词：HBx、蛋白质磷酸酶4催化亚基、去磷酸化、肝细胞癌、迁移、侵袭

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资助基金：福建省科技创新联合资金项目2020Y9004;Joint Funds for the Innovation of Science and Technology of Fujian Province2020Y9004

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：509-516