IL-36在冠状动脉粥样硬化性心脏病患者中的表达及其对CD8 +T细胞的功能调控

摘要：

目的:观察IL-36家族成员在冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heart disease，CAHD)患者中的表达谱，探讨外源性IL-36对CAHD患者CD8
+T细胞功能的调控作用。
方法:研究对象为20例对照者和82例CAHD患者。CAHD患者包括稳定性心绞痛(stable angina pectoris, SAP)患者31例、不稳定性心绞痛(unstable angina pectoris, UAP)患者27例、急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)患者24例。采集抗凝外周血，分离血浆和外周血单个核细胞，ELISA法检测血浆IL-36α、IL-36β、IL-36γ和IL-36受体拮抗剂(IL-36 receptor antagonist, IL-36RA)水平，分选CD8
+T细胞，实时定量PCR法检测CD8
+T细胞中IL-36受体亚基mRNA相对表达量，流式细胞术检测CD8
+T细胞中程序性死亡受体-1(programmed death-1，PD-1)、细胞毒性淋巴细胞相关蛋白-4(cytotoxic T lymphocytes associated protein-4, CTLA-4)、淋巴细胞活化基因-3(lymphocyte-activation gene-3，LAG-3)表达水平，ELISA法检测CD8
+T细胞培养上清中穿孔素、颗粒酶B、颗粒溶素、IFN-γ、TNF-α水平。使用重组人IL-36RA刺激对照者和AMI患者分选CD8
+T细胞，比较刺激前后免疫检查点分子表达、毒性分子和细胞因子分泌差异。组间比较采用单因素方差分析或配对
t检验。
结果:血浆IL-36α、IL-36β和IL-36γ水平在对照组、SAP组、UAP组和AMI组之间的差异无统计学意义(
P>0.05)；AMI组血浆IL-36RA水平显著低于对照组、SAP组和UAP组[(1 159.57±297.83) pg/ml与(1 773.47±754.29) pg/ml、(1 600.12±740.48) pg/ml和(1 578.72±720.42) pg/ml，
P<0.05]。CD8
+T细胞中IL-1受体6(IL-1 receptor 6, IL-1R6)和IL-1受体辅助蛋白(IL-1 receptor accessory protein, IL-1RAcP)mRNA相对表达量、PD-1和CTLA-4的表达、IFN-γ和TNF-α分泌水平在4组之间的差异无统计学意义(
P>0.05)。AMI组CD8
+T细胞分泌穿孔素、颗粒酶B、颗粒溶素的水平高于对照组、SAP组和UAP组(
P<0.05)。重组人IL-36RA刺激不影响对照者CD8
+T细胞免疫检查点分子表达以及毒性分子、细胞因子分泌(
P>0.05)。重组人IL-36RA刺激后，AMI患者PD-1
+CD8
+T细胞比例升高(
P＝0.033)，但CTLA-4
+CD8
+T细胞比例差异无统计学意义(
P＝0.288)。重组人IL-36RA刺激后，AMI患者CD8
+T细胞分泌穿孔素、颗粒酶B、颗粒溶素的水平显著降低(
P<0.05)，但IFN-γ和TNF-α分泌水平差异无统计学意义(
P>0.05)。
结论:AMI患者中IL-36RA水平降低可能促进CD8
+T细胞分泌毒性分子，增强CD8
+T细胞活性，参与AMI发病。

关键词：冠状动脉粥样硬化性心脏病、IL-36、CD8 +T淋巴细胞

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资助基金：河南省科技攻关项目212102310812;Henan Provincial Programs for Science and Technology Development212102310812

在线出版日期：2023-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：464-472