10.3760/cma.j.cn112309-20220215-00045
高毒力肺炎克雷伯菌 hfq基因缺失株的构建及其生物学特性分析
目的:构建高毒力肺炎克雷伯菌NTHU-K2044菌株
hfq基因缺失株(△
hfq),并通过表型试验分析
hfq基因对高毒力肺炎克雷伯菌生长特性、环境适应能力和毒力等生物学特性的影响。
方法:利用同源重组技术对NTUH-K2044菌株进行
hfq基因敲除;通过表型试验,比较高毒力肺炎克雷伯菌野生株和△
hfq突变株在细菌生长速度、抗环境胁迫能力、生物膜形成、荚膜形成中性粒细胞杀菌活性和大蜡螟幼虫感染致死率等方面的差异性。
结果:成功构建高毒力肺炎克雷伯菌NTUH-K2044 △
hfq缺失株,表型试验表明△
hfq缺失株的生长速度显著减慢,菌落变小和超黏性下降;在pH9、pH5.5、0.7 mmol/L SDS、5% NaCl、0.1%H
2O
2环境和50℃高温等环境胁迫条件下,△
hfq缺失株生长受到显著抑制;在毒力方面,△
hfq缺失株生物膜形成能力下降,荚膜形成能力下降且荚膜合成基因
magA和
rmpA表达量明显下降,中性粒细胞杀菌试验存活率下降,大蜡螟幼虫致死能力显著降低。
结论:Hfq蛋白作为RNA伴侣分子能够参与转录后调控进而对高毒力肺炎克雷伯菌生理、环境适应性及毒力致病性具有重要的调控作用。这为寻找治疗和控制高毒力高耐药肺炎克雷伯菌新靶标提供了基础。
高毒力肺炎克雷伯菌、hfq基因 、同源重组、环境适应
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国家自然科学基金地区项目82260403,81860368;江西省卫生健康委计划项目202310458;National Natural Science Foundation of China82260403, 81860368;Science Foundation of Health Commission of Jiangxi Province of China202310458
2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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