肺炎链球菌StkP激酶胞外区与β-内酰胺类抗生素结合位点分析

摘要：

目的:分析肺炎链球菌丝氨酸/苏氨酸激酶StkP胞外区(EC-StkP)基序(motif)在与β-内酰胺类抗生素结合中的作用。方法:分别将EC-StkP的3个motif(SXXK)依次和全部突变为AXXA，将突变后得到的质粒导入受体细胞进行克隆表达，SDS-PAGE联合凝胶图像分析系统检查目的重组突变蛋白(EC-rStkP)表达情况，Ni-NTA亲和层析法分别提纯突变蛋白。采用等温滴定量热法(ITC 200)和表面等离子共振法(Biacore t200)检测突变蛋白与青霉素(PCN)和头孢噻肟(CTX)结合能力。结果:PCN和CTX均不能与第1个、第3个以及3个motif均突变的蛋白质结合，但第2个motif突变后还能与CTX有较弱结合，而与PCN却不能结合。结论:肺炎链球菌StkP激酶胞外区的3个motif都能与β-内酰胺类抗生素结合，且以与第1个motif和第3个motif结合为主。

关键词：肺炎链球菌、丝氨酸/苏氨酸激酶、β-内酰胺类抗生素、SXXK

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资助基金：浙江省医药卫生科技计划项目2020KY737, 2019KY134;杭州市卫生科技计划项目2018Z07;Zhejiang Province Science and Technology Planning Project for Medicine and Healthcare2020KY737, 2019KY134;Hangzhou Health Science and Technology Project2018Z07

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：556-561