单纯疱疹病毒2型糖蛋白D和CCL19佐剂融合重组DNA疫苗对小鼠的免疫保护效果

摘要：

目的:通过比较简单混合和融合重组的单纯疱疹病毒2型糖蛋白D(herpes simplex virus type 2 glycoprotein D，HSV-2 gD)联合分子佐剂CCL19的DNA疫苗对免疫小鼠的免疫应答及免疫保护效果的差异，揭示融合重组疫苗的保护作用。方法:利用基因重组技术构建HSV-2 gD和CCL19单独表达及融合表达的DNA疫苗，经测序、Western blot和ELISA验证后，肌肉注射免疫BALB/c小鼠两次，免疫后定期收集血清和阴道灌洗液，分离免疫后的脾细胞、肠系膜淋巴结细胞及直肠组织。通过终点法ELISA、体外中和试验、免疫组织化学染色、趋化试验、阴道攻毒试验、荧光定量PCR、称量体重及观察疾病严重程度，比较两种形式的疫苗免疫后小鼠的体液免疫、细胞免疫应答和免疫保护作用的差异。结果:融合重组的pgD-IZ-CCL19质粒可在体外正常表达gD蛋白和CCL19蛋白，但pCCL19-IZ-gD质粒的CCL19蛋白表达量比pgD-IZ-CCL19少。免疫pgD-IZ-CCL19的小鼠能产生比pgD+pCCL19组更高水平的血清IgG抗体、阴道灌洗液IgA抗体(
P<0.01)和中和能力。与其他组比较，pgD-IZ-CCL19组小鼠免疫后直肠黏膜、脾脏和肠系膜淋巴结均招募了较多的淋巴细胞，攻毒后该组小鼠未出现体重减少和疾病症状，阴道黏膜HSV-2检出率最低，小鼠死亡率也最低，而pCCL19-IZ-gD组的免疫保护无效。
结论:pgD-IZ-CCL19融合重组的DNA疫苗能诱导小鼠产生较强的免疫应答和免疫保护作用，免疫保护效果优于简单混合DNA疫苗。

关键词：单纯疱疹病毒2型、糖蛋白D、CCL19、中和试验、免疫保护

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资助基金：国家病毒学重点实验室开放课题2019IOV005;无锡市卫健委中青年拔尖人才资助计划BJ2020094;Open Research Fund Program of the State Key Laboratory of Virology of China2019IOV005;Top Talent Support Program for Yong and Middle-aged People of Wuxi Health CommitteeBJ2020094

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：333-341