肝癌细胞来源LC3B阳性的细胞外囊泡诱导CD8 +T细胞耗竭的作用机制研究

摘要：

目的:探讨肝癌细胞来源分泌型自噬体，即一群表达自噬标志LC3B的细胞外囊泡(LC3B
+ extracellular vesicles, LC3B
+EVs)对CD8
+T细胞功能耗竭的影响及其作用机制。
方法:流式细胞术检测肝癌患者外周血和腹水中LC3B
+EVs和PD-1
+CD8
+T细胞比例并分析二者之间的相关性；分离健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)，在αCD3/CD28和IL-2培养条件下加入LC3B
+EVs或经热休克蛋白90α(heat shock protein 90α，HSP90α)封闭抗体封闭后的LC3B
+EVs体外诱导培养72 h，流式细胞术检测PD-1
+CD8
+T细胞和IFN-γ
+CD8
+ T细胞比例以及上清中IL-2、TNF-α和IFN-γ的浓度。
结果:肝癌患者血浆和腹水中LC3B
+EVs及表达HSP90α的LC3B
+EVs比例显著高于健康对照组和非癌性腹水组，且与PD-1
+CD8
+T细胞耗竭比例均呈显著正相关，尤其是HSP90α
+LC3B
+EVs。另外，体外人肝癌细胞来源的LC3B
+ EVs可以诱导CD8
+T细胞耗竭，当采用HSP90α封闭抗体预封闭LC3B
+EVs后，CD8
+T细胞耗竭比例显著降低。
结论:肝癌细胞来源LC3B
+EVs通过膜结合型HSP90α诱导CD8
+T细胞功能耗竭。

关键词：肝癌、细胞外囊泡、CD8 +T细胞耗竭 、热休克蛋白90α

所属期刊栏目：42

资助基金：江苏省自然科学基金项目BK20210081;江苏省卫健委医学科研项目M2021025;徐州市重点研发计划项目KC20110;江苏省双创博士创新项目BK20210081;Natural Science Foundation of Jiangsu ProvinceM2021025;Medical Scientific Research Program of Jiangsu Provincial Health CommissionKC20110;Key Research and Development Program of Xuzhou City;Jiangsu Province′s "Double-Innovation Doctor" Program

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：202-208