红色荧光蛋白mCherry在衣原体感染模型中的应用

摘要：

目的:建立红色荧光蛋白mCherry在衣原体中稳定表达的方法，并使用荧光菌株Cm-mCherry构建有效的衣原体感染模型。方法:构建含有红色荧光蛋白mCherry的重组质粒pmCherry：：CM，利用氯化钙法将pmCherry：：CM转化至衣原体质粒缺失株CMUT中，经过筛选与纯化得到荧光菌株Cm-mCherry。Cm-mCherry感染HeLa229细胞后观察包涵体中红色荧光的发光情况，并与间接免疫荧光染色法比较，评估细胞感染模型构建是否成功；Cm-mCherry感染小鼠后，通过测定下生殖道载菌量、冷冻切片观察上生殖道衣原体红色荧光、分离生殖道评价输卵管积水发病情况，确定Cm-mCherry的感染力、侵袭力与致病性，评估动物感染模型构建是否成功。结果:红色荧光蛋白mCherry在转化株Cm-mCherry中稳定表达，红色荧光蛋白标记法与间接免疫荧光染色法一致度高；Cm-mCherry小鼠感染模型中，感染率为100%(10/10)，下生殖道载菌量可稳定保持高水平，在上生殖道冷冻切片中可观察到带有红色荧光的包涵体，输卵管积水发病程度与Cm野生株差异无统计学意义(
P>0.05)，证实Cm-mCherry有较好的感染力、侵袭力与致病性。
结论:成功建立红色荧光蛋白mCherry在衣原体中稳定表达的方法，转化后的荧光菌株Cm-mCherry有较好的感染力、侵袭力与致病性，可用于衣原体细胞、动物感染模型的构建，为研究衣原体感染机制提供良好的实验工具。

关键词：红色荧光蛋白、mCherry、衣原体、基因表达

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资助基金：国家自然科学基金31670178;湖南省自然科学基金2017JJ2350;National Natural Science Foundation of China31670178;Natural Science Foundation of Hunan Province2017JJ2350

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：950-957