人牙髓间充质干细胞外泌体对小鼠树突状细胞成熟和功能的抑制作用

摘要：

目的 探讨人牙髓间充质干细胞来源外泌体(hDPSC-exosomes)对脂多糖(lipopolysac-charide,LPS)刺激的小鼠树突状细胞(dendritic cells,DC)成熟和功能的影响,评价其对免疫系统的调节作用.方法 原代培养成人恒牙牙髓间充质干细胞,并提取细胞培养基中的外泌体,透射电镜观察其形态及粒径,Western blot检测其表面CD9、CD63的表达.分别用PBS、LPS、LPS+hDPSC-exosomes刺激小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC2.4),24 h后采用流式细胞仪检测其表面共刺激分子的表达,ELISA检测细胞因子的分泌水平,RT-PCR方法检测其TLR2、TLR4和NF-κB的mRNA表达水平,混合淋巴细胞反应(MLR)检测hDPSC-exosomes对DC功能的影响.结果 成功分离成人恒牙牙髓间充质干细胞,其表面高表达CD73、CD90,低表达CD45,hDPSC-exosomes电镜下呈圆形或椭圆微囊小体,直径50～80 nm,其表面标志CD9、CD63表达阳性.hDPSC-exosomes能显著降低LPS刺激后DC表面共刺激分子CD11c和CD86的表达;增加TGF-β降低IL-4的表达水平;同时,hDPSC-exosomes能显著抑制LPS诱导的DC促淋巴细胞增殖的能力;与空白对照组相比,hDPSC-exosomes能促进DC表面TLR2、TLR4 mRNA的表达,上调NF-κB mRNA的表达.结论 本实验结果表明,hDPSC-exosomes能抑制小鼠DC的活化和功能成熟,通过TLR-NF-κB信号通路,促使其向耐受型DC方向发展,诱导免疫耐受调节免疫平衡.

关键词：牙髓间充质干细胞、外泌体、树突状细胞、免疫调节

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在线出版日期：2019-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：506-513