宿主限制性因子MOV10对HBV复制的影响

摘要：

目的 研究宿主限制性因子莫罗尼白血病病毒10蛋白(Moloney leukemia virus 10,MOV10)对乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)复制的调控作用.方法 首先在肝癌细胞Huh7中转染HBV复制质粒,探讨HBV复制和MOV10表达的相关性;接着在Huh7中通过siRNA干扰或过表达MOV10,提取病毒核心颗粒的DNA,通过荧光定量PCR分析病毒复制水平的变化;进一步构建MOV10保守结构域Ⅱ的酶活突变体(D645A、E646Q和G648A),检测突变后对MOV10抗病毒作用的影响;在人肾上皮细胞293细胞中共转染HBV复制质粒和MOV10表达质粒,通过RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation,RIP)研究MOV10与HBV RNA的结合.结果 肝癌细胞Huh7转染HBV复制质粒后,MOV10蛋白水平增高;肝癌细胞Huh7中干扰内源性MOV10后,HBV复制水平升高1.5倍,而Huh7细胞中过表达MOV10,显著抑制了HBV的复制;MOV10结构域Ⅱ突变体同样显著抑制HBV的复制;MOV10可以与HBV 3.5 kb RNA结合.结论 在肝癌细胞中,宿主限制性因子MOV10的表达与HBV复制相关,其抑制HBV复制的作用不依赖于其解旋酶活性,可能与HBV 3.5 kb RNA结合有关.

关键词：MOV10、解旋酶、乙型肝炎病毒、抑制

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资助基金：国家自然科学基金资助项目81471945;重庆市科委自然科学基金项目cstc2018jcyjAX0166;重庆市教委科学技术研究项目KJ1600205 National Natural Science Foundation of China81471945;Natural Science Founda-tion Project of Chongqing Science and Technology Commissioncstc2018jcyjAX0166;Science and Tech-nology Research Project of Chongqing Education CommissionKJ1600205

在线出版日期：2019-01-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：897-901