人巨细胞病毒临床病毒株UL148基因的体外表达及功能位点预测

摘要：

目的 体外获得人巨细胞病毒(human cytomegalovirus, HCMV)临床病毒株 UL148 RNA及探讨其基因功能.方法 将感染HCMV的新生儿尿液接种人胚肺细胞,分离HCMV临床病毒株,并经多重PCR鉴定.扩增UL148基因,经双酶切后克隆入pGEM-T-Easy质粒,构建重组质粒,并置于T7启动子下游,经重组质粒、PCR产物、双酶切产物电泳鉴定及序列测定.克隆成功的质粒以32P标记,进行体外转录RNA.根据UL148序列特征应用生物信息学分析其翻译后修饰位点.结果 成功在体外获得HCMV临床病毒株,经电泳及序列测定证实重组质粒构建成功,在T7 RNA聚合酶作用下,体外获得UL148 RNA.翻译后修饰位点显示UL148基因存在1个与细胞黏附相关的特征序列,1个豆荚外源凝集素β-链标记位点、2个N-豆蔻酰化位点,1个酪氨酸激酶Ⅱ磷酸化位点,7个蛋白激酶C磷酸化位点,1个cAMP/cGMP-依赖性蛋白激酶磷酸化位点和2个N-糖基化位点,1个跨膜区域.结论 UL148基因编码产物可能为一个病毒黏附分子,参与宿主细胞的信号转导作用.

关键词：人巨细胞病毒、临床病毒株、UL148、信号转导

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资助基金：国家自然科学基金81070516;广东省自然科学基金2015A030313726,2016A030313788,9151008901000085;广东省医学科研基金A2015133,A2009078;广东省妇幼保健院国家自然科学基金院内培育项目YN2017G06National Natural Science Foundation of China81070516;Natural Science Founda-tion of Guangdong Province of China2015A030313726,2016A030313788,9151008901000085;Medical Scientific Research Foundation of Guangdong Province of ChinaA2015133,A2009078;National Natural Science Foundation Incubation Project of Guangdong Women and Children′s HospitalYN2017G06

在线出版日期：2018-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：94-97