抗B7-H3单克隆抗体对中性粒细胞哮喘小鼠模型的作用研究

摘要：

目的 探讨阻断型抗小鼠B7-H3单克隆抗体对中性粒细胞哮喘(neutrophilic asthma, NA)小鼠模型的干预作用.方法 BALB/c雌性小鼠24只,随机分成4组,分别为磷酸缓冲盐溶液(PBS)对照组(A组)、中性粒细胞哮喘组(B组)、抗B7-H3单克隆抗体干预组(C组)、同型对照IgG组(D组).B、C、D组均给予OVA联合LPS致敏,OVA雾化激发,A组给予同等剂量的PBS注射和激发,C组和D组在诱导期分别注射50 μg抗B7-H3单克隆抗体和同型对照IgG.观察各组小鼠雾化时的症状;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织;显微镜下进行BALF细胞总数及分类计数;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠BALF上清中IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-17、TNF-α、G-CSF细胞因子的水平;小鼠肺组织病理切片HE染色观察肺组织病理改变;PAS染色观察气道黏液的分泌;同时肺组织免疫组化法检测B7-H3表达水平.结果 (1)B组和D组小鼠雾化激发后出现呼吸急促、烦躁不安、频繁搔抓头面部等表现,C组喘息症状较B组有所缓解,A组活动自如.(2)B组、C组、D组BALF细胞总数、中性粒细胞百分比及嗜酸性粒细胞百分比较A组均明显升高(P均<0.05);C组BALF细胞总数、中性粒细胞百分比和嗜酸性粒细胞百分比较B组、D组降低(P均<0.05);B组与D组比较无显著差异.(3)B组、C组、D组BALF中IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-17、TNF-α、G-CSF水平较A组均显著性上升,其中B组、D组IL-6、TNF-α、IL-17和G-CSF水平比C组明显增高(P均<0.05);IL-4水平B组和D组低于C组(P均<0.05).(4)A组肺组织病理染色示无明显炎症细胞及黏液分泌;B组和D组炎症细胞、中性粒细胞浸润和黏液分泌较A组明显增多,C组较B组、D组有所减轻.(5)肺组织免疫组化显示A组几乎无表达B7-H3阳性细胞,B组和D组B7-H3阳性细胞数明显增多,C组较B组、D组阳性细胞数明显减少(P<0.05).结论 阻断型抗小鼠B7-H3单克隆抗体通过早期阻断B7-H3表达能够减轻NA小鼠喘息症状,减少肺组织炎症细胞浸润和黏液的分泌,下调Th17相关细胞因子分泌,从而减轻NA小鼠肺组织炎症损伤、全身炎症反应,部分阻断NA免疫致病机制的发生发展.

关键词：抗B7-H3单克隆抗体、中性粒细胞哮喘、小鼠模型

所属期刊栏目：37

分类号：R73;R72

资助基金：国家自然科学基金8157010146,81771676 National Natural Science Foundation of China 8157010146,81771676

在线出版日期：2018-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：740-746