10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2017.07.011
鲍曼不动杆菌外膜蛋白OMP33-36抗原多表位的构建与筛选
目的 筛选鲍曼不动杆菌外膜蛋白(outer membrane protein 33×103~36×103, OMP33-36)抗原的B细胞、T细胞表位.方法 运用生物信息学软件预测OMP33-36蛋白分子小鼠B细胞及T细胞表位并人工合成相应肽段;构建重组质粒pET-30a-OMP33-36并原核表达、纯化获得OMP33-36蛋白;以OMP33-36蛋白免疫BALB/c小鼠,5周后收集小鼠血清并分离小鼠脾脏细胞.间接ELISA法检测小鼠血清中B细胞表位抗体水平,双夹心ELISA法检测经候选T细胞表位体外刺激后脾细胞分泌IFN-γ量.结果 构建候选B细胞和T细胞表位各3条,分别为PB1、PB2、PB3,PT1、PT2、PT3;间接ELISA结果显示,PB1及PB2与OMP33-36蛋白免疫组小鼠血清发生反应,其A450值与对照组相比显著升高(P<0.05);双夹心ELISA结果显示,PT3刺激免疫组小鼠脾脏细胞产生的IFN-γ量与对照组相比显著升高(P<0.05). 结论 成功构建并筛选出鲍曼不动杆菌OMP33-36蛋白的2个B细胞表位PB1及PB2,1个T细胞表位PT3.
鲍曼不动杆菌、OMP33-36、抗原表位
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R37;R39
2017-08-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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