利用CRISPR技术下调T细胞功能负调节基因PD-1表达的研究

摘要：

目的：探索慢病毒介导的成簇的规律间隔短回文重复序列( CRISPR)技术下调原代T细胞PD-1基因的可行性。方法将多个PD-1靶向序列作为sgRNA序列体外合成后,分别插入带有cas9基因的慢病毒载体 pLentiCRISPR 中,包装慢病毒并感染原代 T 细胞,通过流式细胞术分析CRISPR技术敲除对PD-1表达的影响。结果构建了6个靶向基因PD-1不同位点的pLentiCRISPR载体A1~A6,并且包装病毒。发现原代T细胞的激活状态与PD-1的表达相伴随,以及PD-1高表达细胞群中存在CD25共表达现象。含有靶向基因PD-1的CRISPR病毒分别感染T细胞后,A2和A6对PD-1高表达的细胞群敲除效率最好,分别为19%和29%。结论 CRISPR技术可在原代T细胞中有效敲除PD-1。

关键词：CRISPR技术、PD-1、CD25

所属期刊栏目：36

分类号：R73;R5

资助基金：上海市浦江人才计划项目14PJ1405600;国家自然科学基金青年科学基金项目81402542Fund program:Shanghai Municipal Pujiang Talents Program14PJ1405600;National Natural Sci-ence Foundation of China81402542

在线出版日期：2016-07-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：414-417