2型登革病毒对原代人肝窦内皮细胞凋亡、自噬以及相关基因表达的影响

摘要：

目的：研究2型登革病毒（DENV-2）感染原代人肝窦内皮细胞（HHSECs）后，HHSECs的凋亡、自噬，细胞间黏附分子-1（ICAM-1）及 Beclin-1 mRNA 水平的表达，分析 DENV-2致病过程中可能的作用机制。方法用 DENV-2（MOI=1）作用于 HHSECs，Real-time PCR 动态检测 DENV-2 NS1部分序列；CCK-8法动态检测 DENV-2对 HHSECs 的毒性作用。real-time PCR 动态检测被感染 HH-SECs 的 ICAM-1、Beclin-1 mRNA 的表达水平。流式细胞术检测被感染 HHSECs 的细胞凋亡率，以及LC3B 和 ICAM-1的表达。结果被 DENV-2作用后的 HHSECs 有 NS1部分基因序列的表达。DENV-2感染细胞后，CCK-8法检测细胞的抑制率分别为（10.90±1.24）%（12 h）、（16.40±0.42）%（24 h）、（17.00±0.46）%（36 h）、（29.60±0.26）%（48 h）。Real-time PCR 检测 HHSECs 中 Beclin-1及 ICAM-1 mRNA 的表达，以未感染组为对照，2-△△Ct值于24 h 达峰值，分别为46.77±2.55和40.97±4.91。流式细胞术动态观察被 DENV-2感染的 HHSECs 的凋亡，于12 h 较明显，凋亡率为13.17%；36 h 时LC3B 的表达率（35.50%）达到峰值；ICAM-1的表达率分别为9.17%（12 h）、14.7%（24 h）、12.7%（36 h）、11.6%（48 h）。结论 HHSECs对 DENV-2易感。DENV-2可激活 HHSECs，诱导 ICAM-1上调；可促进自噬的发生，于早期诱导 HHSECs 细胞凋亡。

关键词：登革病毒、原代人肝窦内皮细胞、凋亡、自噬、Beclin-1、ICAM-1

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分类号：R51;S47

资助基金：国家自然科学基金31260224，81560263；贵州省教育厅“十二五”重大科技专项黔教合重大专项字[2012]008号Fund programNational Natural Science Foundation of China31260224，81560263；Science and Technology Major Project of Education Department of Guizhou Province during the 12th Five-Year Plan Peri-od[2012]008

在线出版日期：2016-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：340-345