骨髓间充质干细胞在淋巴细胞参与下对 HBV 作用的体外研究

摘要：

目的：探讨骨髓间充质干细胞（ bone marrow mesenchymal stem cells，BM MSCs）在体外淋巴细胞参与下对乙型肝炎病毒（ hepatitis B virus，HBV）复制的影响及其机制。方法选择培养状态良好的HepG2．2．15细胞，提取BN大鼠BM MSCs及新鲜脾淋巴细胞做共培养。实验分5组，分别于培养24 h、48 h及72 h后，采用MTT检测脾淋巴细胞及HepG2．2．15细胞活性，实时定量PCR测定HBV DNA及HBV cccDNA水平，流式细胞术检测T细胞亚群比例变化， ELISA检测细胞因子水平。结果在体外细胞培养的环境下，HBV DNA及HBV cccDNA在24 h、48 h及72 h时，与单纯HepG 2．2．15细胞组、BM MSCs＋HepG2．2．15细胞组及脾淋巴细胞＋HepG2．2．15细胞组比较，脾淋巴细胞＋BM MSCs＋HepG2．2．15细胞组表达水平明显降低，且在48 h 时差异有统计学意义， HBV DNA：（181．000±14．731） IU／ml vs （6270．000±300．450） IU／ml、（2564．000±231．058） IU／ml、（2433．300±302．379） IU／ml；HBV cccDNA：（4．330×105±0．464×105） IU／ml vs （11．100×105±0．375×105） IU／ml、（8．930×105±0．778×105） IU／ml、（9．850×105±0．810×105） IU／ml（P＜0．01）。细胞因子：IFN-γ与HBV DNA水平呈负相关，IL-10及IL-22分泌水平与HBV DNA水平呈正相关。 T细胞亚群：CD4＋／CD8＋升高，CD8＋细胞百分率与HBV DNA水平呈正相关。结论 BM MSCs可以抑制HBV DNA的表达，提高对HBV的清除能力，是通过调节Tc1／Tc2平衡和自身分泌方式，进而调节细胞因子表达水平实现的。

关键词：乙型肝炎病毒、骨髓间充质干细胞、淋巴细胞、细胞因子

资助基金：国家自然基金面上项目81270528，81170444，81441022；天津市应用基础及前沿技术研究计划项目重点资助08JCYBJC08400，11JCZDJC27800，12JCZDJC25200；天津市卫生局科技基金攻关项目2011KY11，10KG101

在线出版日期：2015-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：194-199