10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2015.03.008
骨髓间充质干细胞在淋巴细胞参与下对 HBV 作用的体外研究
目的:探讨骨髓间充质干细胞( bone marrow mesenchymal stem cells,BM MSCs)在体外淋巴细胞参与下对乙型肝炎病毒( hepatitis B virus,HBV)复制的影响及其机制。方法选择培养状态良好的HepG2.2.15细胞,提取BN大鼠BM MSCs及新鲜脾淋巴细胞做共培养。实验分5组,分别于培养24 h、48 h及72 h后,采用MTT检测脾淋巴细胞及HepG2.2.15细胞活性,实时定量PCR测定HBV DNA及HBV cccDNA水平,流式细胞术检测T细胞亚群比例变化, ELISA检测细胞因子水平。结果在体外细胞培养的环境下,HBV DNA及HBV cccDNA在24 h、48 h及72 h时,与单纯HepG 2.2.15细胞组、BM MSCs+HepG2.2.15细胞组及脾淋巴细胞+HepG2.2.15细胞组比较,脾淋巴细胞+BM MSCs+HepG2.2.15细胞组表达水平明显降低,且在48 h 时差异有统计学意义, HBV DNA:(181.000±14.731) IU/ml vs (6270.000±300.450) IU/ml、(2564.000±231.058) IU/ml、(2433.300±302.379) IU/ml;HBV cccDNA:(4.330×105±0.464×105) IU/ml vs (11.100×105±0.375×105) IU/ml、(8.930×105±0.778×105) IU/ml、(9.850×105±0.810×105) IU/ml(P<0.01)。细胞因子:IFN-γ与HBV DNA水平呈负相关,IL-10及IL-22分泌水平与HBV DNA水平呈正相关。 T细胞亚群:CD4+/CD8+升高,CD8+细胞百分率与HBV DNA水平呈正相关。结论 BM MSCs可以抑制HBV DNA的表达,提高对HBV的清除能力,是通过调节Tc1/Tc2平衡和自身分泌方式,进而调节细胞因子表达水平实现的。
乙型肝炎病毒、骨髓间充质干细胞、淋巴细胞、细胞因子
国家自然基金面上项目81270528,81170444,81441022;天津市应用基础及前沿技术研究计划项目重点资助08JCYBJC08400,11JCZDJC27800,12JCZDJC25200;天津市卫生局科技基金攻关项目2011KY11,10KG101
2015-05-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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