10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2015.01.008
纳米载体组氨酸接枝聚介导的 shRNA 对大鼠肝脏 MyD88基因表达的干扰作用
目的:研究应用纳米载体组氨酸接枝聚(β-氨基酯)(HGPAEs)介导的RNA干扰技术对大鼠肝脏髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)基因表达的抑制作用。方法构建HGPAEs及针对大鼠MyD88基因的shRNA( small hairpin RNA)质粒,并将二者耦合成pMyD88-HGPAEs载体,分别设置生理盐水组、HGPAEs 组、pHK-HGPAEs 阴性对照组、shRNA 组和pMyD88-HGPAEs干预组,通过门静脉注射方法体内转染大鼠肝脏,分别采用荧光定量PCR技术和蛋白印迹法( Western blot )检测转染后的MyD88转录水平及蛋白表达水平。结果成功构建载shRNA质粒的HGPAEs载体,体内转染大鼠肝脏后,shRNA组及pMyD88-HGPAEs干预组MyD88基因表达水平差异具有统计学意义(P<0.05)。与其他4组相比,pMyD88-HGPAEs干预组MyD88基因的mRNA转录水平及蛋白表达水平显著下降( P<0.01),而生理盐水组、单纯HGPAEs组、pHK-HGPAEs阴性对照组转染后MyD88基因mRNA转录水平及蛋白表达水平差异无统计学意义( P>0.05)。结论 HGPAEs是一种较为理想的基因转运载体,应用针对大鼠MyD88基因的载shRNA质粒的HGPAEs载体,经门静脉注射方法转染大鼠肝脏可显著性抑制MyD88基因表达,本实验成果的取得为下一步动物实验提供一定的资料。
组氨酸接枝聚(β-氨基酯)、髓样分化因子88、RNA干扰
R73;R9
国家自然科学基金81102246;教育部高等学校博士学科点专项科研基金20101202120009;天津市自然科学基金13JCQNJC11900;天津市卫生局科研基金2011KZ66
2015-02-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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