麻疹减毒活疫苗 S191感染性克隆的构建及鉴定

摘要：

目的：构建稳定的麻疹减毒活疫苗 S191感染性克隆。方法采用全基因合成方法获得麻疹减毒活疫苗 S191 cDNA 全长及辅助蛋白 N、P、L 基因片段，分别将该4个基因构建入转录与表达载体 pVAX1后，共转染293T 细胞，通过与 Vero 细胞共培养拯救出麻疹病毒，对拯救获得的病毒用间接免疫荧光法、传代实验及序列测定进行鉴定分析。结果酶切及测序表明除遗传标签（突变碱基2101 C-A）外其基因序列正确，用免疫荧光技术证实其能与麻疹病毒核衣壳蛋白和磷蛋白单克隆抗体产生特异性反应，所拯救病毒感染 Vero 细胞后可致细胞病变效应，传代实验表明病毒可以稳定感染 Vero 细胞。结论成功构建了稳定的麻疹减毒活疫苗 S191感染性克隆，初步建立了用于麻疹病毒研究的反向遗传学方法，为新型疫苗的研发提供参考资料。

关键词：麻疹病毒、反向遗传学、RNA 聚合酶

分类号：R51;R39

资助基金：传染病防治重大专项2008ZX10004-014

在线出版日期：2015-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：921-927