人源化抗 VEGF 单克隆抗体制品的大小异质性分析

摘要：

目的：比较十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ sodium dodecyl sulfatepolyacrylam-ide gel electrophoresis ，CE-SDS）和分子排阻高效液相（ size exclusion high performance liquid chromatogra-phy，SE-HPLC）在单克隆抗体（单抗）大小异质性分析中的区别。方法应用非还原和还原CE-SDS以及常规、变性和变性还原SE-HPLC评价人源化抗血管内皮细胞生长因子（ VEGF）单抗的大小异质性。结果对于多聚体的分析，虽然非还原CE-SDS结果显示其含量为0．82％±0．01％，显著低于常规SE-HPLC的分析结果（5．08％±0．10％），但与变性SE-HPLC的分析结果（1．05％±0．02％）则基本一致；在非还原状态下对单抗的片段分析，非还原CE-SDS结果显示其含量为7．12％±0．04％，显著高于常规SE-HPLC的分析结果（0．02％±0．01％）以及变性SE-HPLC的分析结果（0．62％±0．01％）；而在还原状态下对单抗的片段分析，还原CE-SDS结果显示其含量为（3．19％±0．50％），其含量同样高于变性还原SE-HPLC的分析结果（0．07％±0．01％）。结论在分析多聚体含量时，由于常规SE-HPLC对共价和非共价连接的多聚体形式均可显示，相比CE-SDS相比更加客观；而在分析片段含量时，非还原CE-SDS可显示非共价键连接的片段，还原CE-SDS可显示降解片段，所以CE-SDS相比常规SE-HPLC更具优势。两种不同原理分析方法的组合有效保障了单抗制品大小异质性的质量控制。

关键词：单克隆抗体、大小异质性、CE-SDS、SE-HPLC、多聚体、片段

分类号：R99;H31

资助基金：国家“重大新药创制”科技重大专项2014ZX09304311-001

在线出版日期：2014-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：718-722