10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2014.06.008
Zn2+及其谷氨酸结合位点突变对金黄色葡萄球菌肠毒素 C2超抗原活性的影响
目的:研究金黄色葡萄球菌(金葡菌)肠毒素C2(SEC2)中与Zn2+结合相关的谷氨酸残基突变及Zn2+自身对其超抗原活性的影响。方法应用定点突变技术将SEC2中与Zn2+结合相关的谷氨酸残基突变成丙氨酸残基,分离纯化后获得突变蛋白rSEC2(E71A)、rSEC2(E80A)及rSEC2(E71A/E80A);突变蛋白的超抗原活性及Zn2+对SEC2超抗原活性的影响通过MTT法检测其刺激小鼠脾淋巴细胞的增殖来验证,而结构稳定性通过对胃蛋白酶及胰蛋白酶的抵抗能力来检测。结果蛋白酶酶切结果与脾淋巴细胞增殖实验结果表明参与第2个Zn2+结合的71位及80位谷氨酸残基突变对SEC2的酶解稳定性及超抗原活性没有显著影响;但微量Zn2+(10μmol/L)却能显著增强rSEC2的超抗原活性,并且在EDTA存在下,仅有Zn2+在一定浓度下才可完全恢复其超抗原活性。结论SEC2分子中的Zn2+结合位点的突变对其自身结构稳定性和超抗原活性无显著影响,但SEC2超抗原活性发挥过程中Zn2+可能通过其他途径间接影响其超抗原活性。
Zn2+、金黄色葡萄球菌肠毒素C2、超抗原、T淋巴细胞
R77;R73
国家科技重大专项重大新药创制2012ZX09102301-013;新乡医学院博士科研启动基金505033
2014-07-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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