Zn2＋及其谷氨酸结合位点突变对金黄色葡萄球菌肠毒素 C2超抗原活性的影响

摘要：

目的：研究金黄色葡萄球菌（金葡菌）肠毒素C2（SEC2）中与Zn2＋结合相关的谷氨酸残基突变及Zn2＋自身对其超抗原活性的影响。方法应用定点突变技术将SEC2中与Zn2＋结合相关的谷氨酸残基突变成丙氨酸残基，分离纯化后获得突变蛋白rSEC2（E71A）、rSEC2（E80A）及rSEC2（E71A/E80A）；突变蛋白的超抗原活性及Zn2＋对SEC2超抗原活性的影响通过MTT法检测其刺激小鼠脾淋巴细胞的增殖来验证，而结构稳定性通过对胃蛋白酶及胰蛋白酶的抵抗能力来检测。结果蛋白酶酶切结果与脾淋巴细胞增殖实验结果表明参与第2个Zn2＋结合的71位及80位谷氨酸残基突变对SEC2的酶解稳定性及超抗原活性没有显著影响；但微量Zn2＋（10μmol/L）却能显著增强rSEC2的超抗原活性，并且在EDTA存在下，仅有Zn2＋在一定浓度下才可完全恢复其超抗原活性。结论SEC2分子中的Zn2＋结合位点的突变对其自身结构稳定性和超抗原活性无显著影响，但SEC2超抗原活性发挥过程中Zn2＋可能通过其他途径间接影响其超抗原活性。

关键词：Zn2+、金黄色葡萄球菌肠毒素C2、超抗原、T淋巴细胞

分类号：R77;R73

资助基金：国家科技重大专项重大新药创制2012ZX09102301-013；新乡医学院博士科研启动基金505033

在线出版日期：2014-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：442-446