人血清抗肺炎链球菌荚膜多糖抗体 IgG 定量ELISA 方法的建立与验证

摘要：

目的：建立WHO推荐的检测人血清抗肺炎链球菌（ Streptococcus pneumoniae）荚膜多糖抗体IgG定量ELISA（Pn PS ELISA）。方法依照WHO推荐的Pn PS ELISA标准操作要求，优化荚膜多糖的包被浓度，筛选合格的ELISA板和二抗；在检测WHO参考实验室提供的质量控制血清验证实验条件的基础上，分别在WHO参考实验室和兰州生物制品研究所有限责任公司（ LIBP）实验室检测16份由LIBP制备的质控血清中抗13种肺炎链球菌血清型（1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F、23F）的荚膜多糖IgG抗体浓度。同时，在LIBP 实验室建立了实验室内部质控血清907的检测范围，并评价了LIBP实验室实验间检测值的精确度。结果在WHO参考实验室和LIBP实验室分别检测的16份LIBP质控血清的抗13种肺炎链球菌血清型荚膜多糖IgG抗体浓度具有良好的相关关系（slope＝0．94，r＝0．97， P＜0．05）。 LIBP实验室的检测值有81％落在WHO参考实验检测值±40％范围内，符合评价实验室之间所用方法的75％的数据在±40％的检测值范围内的标准。建立了LIBP实验室内部质控血清907的抗13种肺炎链球菌血清型荚膜多糖抗体IgG的检测值范围。 LIBP实验室质控血清的各血清型IgG抗体浓度的实验间检测值的变异系数（ CV）均＜30％。结论 LIBP实验室成功建立了WHO推荐的检测人血清中抗肺炎链球菌荚膜多糖抗体IgG定量ELISA方法，并确定了LIBP 实验室日常用质控血清907的检测值范围。

关键词：肺炎链球菌、抗荚膜多糖IgG抗体含量、酶联免疫吸附试验

分类号：R37;R51

资助基金：国家科技支撑计划课题2008BAI66B01；重大新药创制专项课题2011ZX09401-403

在线出版日期：2013-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：783-788