10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2013.07.011
金黄色葡萄球菌重组蛋白AtlM的体外抗菌效应初步探讨
目的通过基因工程技术获取金黄色葡萄球菌( ATCC25923)自溶素片段AtlM重组蛋白( rAtlM),初步探讨其体外抗菌效应。方法根据GenBank 中金黄色葡萄球菌atlM基因序列( AC:D17366)设计合成特异引物,采用PCR技术扩增相应的序列并构建重组表达质粒pET-32а(+)/atlM,经由IPTG诱导后通过等电点洗脱技术获取纯化的rAtlM;采用微量肉汤稀释法测定rAtlM对ATCC25923及其苯唑西林诱导耐药株的最低抑菌浓度( minimal inhibitory concentration ,MIC);体外试验测定rAtlM对ATCC25923菌株及其耐药株的抗菌活性。结果成功构建了原核表达载体pET-32а(+)/atlM,表达的重组蛋白AtlM对ATCC25923标准株和耐药株的MIC分别为8μg/ml和64μg/ml。体外抑菌试验显示rAtlM作用于ATCC25923标准株和耐药株1 h后即对细菌生长具有抑制作用( P值分别为0.004和0.026),对标准株作用持续到5 h测定点(P=0.012),对苯唑西林耐药株作用持续到3 h测定点(P=0.001),5 h后与未加药物的对照组相比差异无统计学意义(P=0.102)。结论50μg/ml的rAtlM对金黄色葡萄球菌( ATCC25923)及苯唑西林耐药株初步显示出一定的抑菌作用,具有作为抗菌药物的可能性。
金黄色葡萄球菌、自溶素、抗菌药、基因表达
R96;R37
辽宁省科技厅自然科技基金资助项目201202053
2013-09-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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