尿路致病性大肠杆菌ppk1基因缺失株的构建及其生物学特性研究

摘要：

目的构建尿路致病性大肠杆菌CFT073的聚磷酸盐激酶1（ polyphosphate kinase ， PPK1）基因敲除株，并初步探索其体外生物学特性。方法以CFT073株为研究对象，利用Red同源重组技术敲除CFT073的ppk1基因，构建敲除株△pk1；通过细胞实验即以人膀胱癌上皮细胞5637为体外模型对CFT073野生型菌株、敲除菌株的黏附及侵袭能力进行比较；采用96孔板结晶紫染色法分析CFT073 ppk1基因敲除对其生物膜形成能力的影响。结果成功构建了CFT073 ppk1基因敲除株；敲除ppk1后，细菌对膀胱癌上皮细胞的黏附、侵袭能力较野生株都明显减弱；△pk1在各时间点570 nm处结晶紫吸光度值均较野生株的低。结论利用Red同源重组技术可成功敲除CFT073的ppk1基因，ppk1在尿路致病性大肠杆菌黏附、侵袭尿路上皮及生物膜形成过程中可能发挥了重要作用。

关键词：尿路感染、大肠杆菌、基因敲除、聚磷酸盐激酶1

分类号：R37;S85

资助基金：广州医科大学博士启动项目2011 C48；国家自然科学基金青年项目81200505

在线出版日期：2013-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：531-536