创伤弧菌诱导树突状细胞凋亡的过程观察

摘要：

目的 实验观察创伤弧菌(Vibrio vulnificus,Vv)诱导鼠树突状细胞(dendritic cell,DC)凋亡的过程.方法 建立小鼠树突状细胞(DC2.4株)与创伤弧菌(Vv1.1758株)混合培养模型,DAPI荧光染色分析细胞凋亡的形态特征,DNA Ladder检测凋亡细胞的DNA片段化水平分析,Annexin V FITC/PI染色分析DC2.4细胞凋亡率,分光光度法测定caspase-3、caspase-8活性,JC-1荧光标记检测线粒体膜电位(△Ψm)变化.结果 Vv1.1758株与DC2.4细胞混合培养4h时DAPI荧光染色出现典型的凋亡特征——染色质浓缩及边缘化；DNA琼脂糖凝胶电泳出现凋亡条带；2、4、6h细胞凋亡率分别为(37.8±9.8)％、(54.3±12.7)％和(68.2±14.6)％；1、2、4h线粒体膜电位(△ψm)分别下降了7.1％、16.1％与46.7％；caspase-8活性在1.5h增高,2h达高峰(2.48±0.19) U/μg,而caspase-3活性于3h开始增高,4h达高峰(1.91±0.16) U/μg.结论 创伤弧菌诱导树突状细胞可通过线粒体膜电位下降及激活caspase-8启动子两条途径,最终活化效应因子caspase-3,促使细胞凋亡发生.

关键词：创伤弧菌、树突状细胞、凋亡、线粒体膜电位、半胱氨酸天冬氨酸酶家族

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分类号：R516.7(传染病)

资助基金：浙江省科技厅计划项目2009F70011;嘉兴市科技计划项目2009AY2047;浙江省大学生科技创新项目2011R417028

在线出版日期：2012-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：491-495