10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2012.05.017
HPV多肽致敏的树突状细胞体外激发特异性CTL能力的研究
目的 观察以高危型人乳头瘤病毒16型(HPV16) E6和E7基因编码的多肽E613-21(KLPDLCTEL)和E786-94(TLGIVCPI)为抗原负载的树突状细胞(DC)体外诱导特异性CTL的能力.方法 采集HPV+HLA-A2+宫颈癌患者外周血,分离单核细胞(Mo)与外周淋巴细胞(PBL);将Mo诱导成DC后负载E6和E7多肽,用其反复致敏PBL(3次);ELISA法检测致敏细胞上清细胞因子分泌水平;流式细胞标记法检测致敏细胞中特异性CTL的比例;MTT法检测致敏细胞杀伤靶细胞的能力.结果 11例HPV 16+ HLA-A2+宫颈癌患者DC平均得率为(10.79±0.88) ×l06(每100 ml外周血),CD11c+ HLA-DR+为(97.15±2.41)%,其中CD80+为(84.28±5.39)%,CD83+为(85.17+5.06)%,CD86+为(97.74±0.87)%.PBLs致敏3次后,平均增殖(15.4±1.5)倍;致敏第21天上清细胞因子水平分别为:IL-2(2551.9±195.3) pg/ml、IL-12(554.9士64.0)pg/ml、IFN-γ(2416.9±281.7)pg/ml,TNF-α(632.4±71.1) pg/ml,明显高于未致敏组(P<0.05),IL-10(235.1+34.7) pg/ml与对照组比较无显著差异;特异性CTL的平均比例为(6.32±1.54)%,明显高于对照组(P<0.05),对负载E6、E7多肽的T2细胞株杀伤率明显高于对照组(P<0.05).结论 HPV E6和E7混合多肽负载的DC体外能有效地诱导特异性CTL,刺激Thl型细胞因子的分泌,为治疗型宫颈癌疫苗的研制提供科学依据.
人乳头瘤病毒、多肽、树突状细胞、细胞毒性T细胞
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R392.11
江苏省"六大人才高峰"第四批高层次人才项目资助07C003
2012-10-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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