10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2010.11.002
膜结合型HLA-G1~G4分子的克隆表达及对NK细胞杀伤功能的影响
目的 探讨膜结合型HLA-G1~G4异构体的表达及对NK细胞杀伤功能的影响.方法 通过基因克隆及转染,分别建立稳定表达HLA-G1~G4抗原的人绒癌JAR细胞株.采用RTPCR、流式细胞术、Western blot及免疫细胞化学法分析、鉴定转染细胞中HLA-G的mRNA及蛋白表达.通过加载HLA-G高亲和性KIPAQFYIL抗原肽,观察对HLA-G表达的影响.LDH释放法检测HLA-G1~G4表达对NK细胞杀伤活性的影响.结果 RT-PCR、Western blot及免疫细胞化学结果显示,HLA-G1~G4/pVITRO2-mcs重组质粒成功转染HLA-G表达阴性的人绒癌JAR细胞株.FACS分析显示HLA-G1抗原能在JAR-HLA-G1细胞株表面表达,HLA-G2~G4抗原不能有效到达细胞表面.体外杀伤试验发现表达HLA-G1~G4抗原的细胞均能抑制NK细胞的杀伤活性(P<0.05);加载HLA-G高亲和性KIPAQFYIL抗原肽对HLA-G表达无明显影响,对NK细胞杀伤抑制程度也未见明显改变.结论 HLA-G1~G4能够明显抑制NK细胞的杀伤活性,提示不同膜结合型HLA-G异构体分子均能作为免疫耐受分子,具备免疫调节功能.
HLA-G、异构体、转染、细胞毒性
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R3(基础医学)
浙江省科技计划2008C33013;2009C33147
2010-12-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
982-986