中和抗肾小球基底膜抗体的单链抗体的筛选与鉴定

摘要：

目的 制备人抗肾小球基底膜(GBM)抗体的特异性人源化单链可变区抗体.方法 采用噬菌体表面展示技术,获得一个与人抗GBM抗体结合活性较强的单链可变区抗体片段的阳性克隆,并对该克隆进行DNA序列测定分析.结果 对噬菌体单链可变区抗体库经过3轮筛选后,与第1轮相比富集了137倍.噬菌体抗体与人抗GBM抗体的结合活性其中有35株克隆ELISA的吸光度较高.对这些噬菌体抗体进行交叉反应后,确定其中有10株交叉反应较弱.确定1株(C31)阳性克隆提取质粒,进行DNA序列测定,大小为750 bp,并符合人源化单链可变区抗体的序列结构.结论 应用噬菌体展示技术成功获得人-抗GBM抗体的单链可变区抗体基因,为临床上治疗Goodpasture综合征奠定实验基础.

关键词：噬菌体展示技术、抗肾小球基底膜抗体

所属期刊栏目：30

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家卫生部资助项目WKJ2007-2-033;河南省医学科技攻关重大项目200701006

在线出版日期：2010-11-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：791-794