10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2010.02.014
热休克E.G7-OVA肿瘤细胞来源的exosomes的抗肿瘤作用
目的 本研究探讨热休克E.G7-OVA肿瘤细胞来源的exosomes的体内抗肿瘤效应.方法 通过分级离心和蔗糖密度梯度离心法分离和纯化E.G7-OVA肿瘤细胞来源的exosomes.热休克E.G7-OVA肿瘤细胞来源的exosomes和未热休克E.G7-OVA肿瘤细胞来源的exosomes分别命名为Exo/HS和Exo.通过电镜观察exosomes的形态,Western blot检测exosomes的蛋白成分.以Exo、Exo/HS、PBS免疫小鼠,用E.G7-OVA肿瘤细胞进行攻击,观察各组免疫保护效应;建立E.G7-OVA荷瘤小鼠模型,观察各组免疫治疗效应.通过LDH法检测各组免疫小鼠脾细胞CTL活性.结果 电镜下exosomes为双层膜的囊泡样结构,直径为40~100 nm.Western blot结果 表明:Exo和Exo/HS都含有HSC70、HSP70、HSP60、HSP90、MHC Ⅰ和OVA分子,而Exo/HS中HSP70和MHC Ⅰ分子的含量更高.免疫保护试验发现,Exo/HS组免疫小鼠90 d的无瘤率显著高于Exo组和PBS组(50%、20%、0%,P<0.01);对荷瘤小鼠的免疫治疗显示,Exo/HS对荷瘤小鼠的肿瘤抑制效应显著高于Exo组和PBS组(P<0.01).CTL结果 表明,Exo/HS免疫小鼠诱导的OVA抗原特异性的CTL活性显著高于Exo组和PBS组(P<0.01).结论 热休克E.G7-OVA肿瘤细胞来源的exosomes可作为有效的肿瘤疫苗.
热休克、E.G7-OVA细胞、Exosomes、抗肿瘤效应
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R73(肿瘤学)
浙江省医药卫生科学研究基金2008 B023
2010-05-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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