pLXSN-BDNF体外转染神经干细胞及其外源基因的表达

摘要：

目的 建立体外稳定表达脑源性神经生长因子(BDNF)的神经干细胞(NSCs).方法 采用有限稀释法纯化体外培养的NSCs.用重组和空白逆转录病毒感染NSCs,分别采用荧光定量PCR法和ELISA法检测3组(pLXSN-BDNF病毒感染组、pLXSN病毒感染组、空白对照组)NSCs中外源基因的表达水平.结果 荧光定量PCR法测定pLXSN-BDNF组BDNF原始模板拷贝数为(19.57±0.65)×10~3copies/μl,与其余两组比较差异有统计学意义(P<0.05);ELISA法测定pLXSN-BDNF组NSCs细胞上清中BDNF含量最高,与其余两组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 用携带BDNF的重组逆转录病毒能成功地将外源基因导入NSCs中,为NSCs眼内移植研究,也为基因治疗视神经损伤的量化研究提供实验依据.

关键词：神经干细胞、纯化、重组逆转录病毒、荧光定最PCR法、ELISA法

所属期刊栏目：29

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金30471844;黑龙江省教育厅资助项目10551187

在线出版日期：2009-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：786-791