表达呼吸道合胞病毒F蛋白编码基因的重组腺病毒载体的构建

摘要：

目的 构建表达呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)F蛋白编码基因片段的重组腺病毒.方法 以RSV RNA为模板,利用RT-PCR扩增出F基因片段,应用AdEasy腺病毒载体系统,构建含有目的 基因的蕈组穿梭质粒pShuttle-CMV/F,再转化含有骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183-AD-1获得重组腺病毒质粒pAdEasy/F.将该质粒转染293细胞包装产生出重组腺病毒rAd/F.重组腺病毒分别经电子显微镜技术、RT-PCR、Western blot和间接免疫荧光方法进行鉴定.并对该重组腺病毒的滴度和遗传稳定性进行了初步研究.结果 获得了含有RSV F基因片段的重组腺病毒rAd/F,电子显微镜下可见典型腺病毒颗粒形态,RT-PCR、Western blot和间接免疫荧光方法分析显示rAd/F中的F基因片段可以在293细胞中有效转录和表达.结论 成功构建出含有RSV F基因片段的苇组腺病毒rAd/F,为进一步研究重组腺病毒载体疫苗奠定了基础.

关键词：呼吸道合胞病毒、融合蛋白、腺病毒载体

所属期刊栏目：29

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2009-06-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：431-437