结核分枝杆菌特异性CD4+α/β T细胞受体四聚体筛选细胞系的构建及检测

摘要：

目的 构建及应用结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)特异性CD4+α/βT细胞受体(TCR)四聚体筛选细胞系.方法 从Mtb多肽阳件反应结核患者中,PCR扩增HLA-DR β链,构建HLA-DR β链和加载有结核抗原肽的HLA-DR α链全长基因的表达载体pMT-HLA-DRB及pMT-HLA-DRA-P,磷酸钙转染法转入果蝇S2(Schneider2)细胞中进行表达配对,细胞免疫组化法初步鉴定表达情况,并应用所建立细胞系以流式细胞术筛选Mtb特异性CD4+α/βTCR四聚体.结果 细胞免疫组化法及流式细胞术鉴定显示获得细胞膜上表达结核抗原肽/HLA-DR复合物的稳定S2细胞株,并筛选出2种Mtb特异性CD4+α/β TCR四聚体.结论 成功构建Mtb特异性CD4+α/β TCR四聚体筛选细胞系,为分析鉴定Mtb特异反应性TCR四聚体,探索开发结核诊断新方法 及新型结核疫苗的研制提供了工具.

关键词：Mtb肽/HLA-DR复合物、CD4+α/β TCR四聚体、真核表达

所属期刊栏目：29

分类号：R4(临床医学)

资助基金：国家自然科学基金重点项目30430660

在线出版日期：2009-05-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：271-275