HCMV pp150抗原基因在蚕豆中的遗传转化及鉴定

摘要：

目的 研制人巨细胞病毒(HCMV)口服疫苗.方法 根据HCMV基质磷蛋白PP150基因序列设计引物,PCR法从HCMV ADl69株基因组DNA中扩增出编码PP150抗原决定簇区域的基因片段.将Kozak序列插入PP150基因的起始密码子的上游,3'端引入了内质网滞留信号KDEL序列,将修饰后的基因片段克隆进载体pB1121,构建了带潮霉素(Hyg)选择抗性基因的植物表达载体pCAM BIA1300/pp150和根癌农杆菌工程菌EHA105;采用叶盘法转化蚕豆,获得了5株抗性植株,通过PCR、Southern blot和RNA dot blot分析鉴定,确认了3株为转基因植株.通过ELISA和Western blot对这3株的蛋白萃取物进行分析,以鉴定其免疫学活性.结果 这3株转基因植株表达的PP150蛋白具有免疫原活性.结论 这些转基因植株为HCMV口服疫苗的研究提供了条件.

关键词：人巨细胞病毒、pp150、口服疫苗、转基因蚕豆

所属期刊栏目：27

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2008-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1150-1154