H3、H5、H7、H9亚型流感病毒通用多表位核酸疫苗构建及表达研究

摘要：

目的 构建表达A型流感病毒多种表位的核酸疫苗,并研究其在幼仓鼠肾细胞(BHK细胞)内表达产物的生物学活性.方法 筛选流感病毒主要抗原(HA、NA、NP、M)表位基因,以生物信息学软件优化其排列结构,合成流感通用的复合多表位基因(Epi),以H5、H7亚型流感病毒HA融合表达基因为骨架,将多表位基因Epi插入构建H7HA-Epi-H5HA阅读盒,定向克隆至pVAX1,构建抗A型流感H3579亚型的pVAX1-H7HA-Epi-H5HA.最后将该重组质粒转染BHK细胞,提取细胞总RNA,以RT-PCR方法检测目的基因;以间接免疫荧光试验(IFA)初步测其表达产物抗原性.结果 RT-PCR检测到目的基因;IFA检测到特异性荧光存在.结论 本试验所构建的重组质粒pVAX1-H7HA-EpiH5HA,在真核细胞内均获了有效地转录和表达;而且其表达产物均能与相应的抗体特异性结合,证明了其具有一定的生物学活性和抗原性,有望成为抗多种A型流感病毒的通用核酸疫苗.

关键词：表位、流感病毒、核酸疫苗

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分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2006AA10A205;教育部科学技术研究项目306006;吉林省科技计划20065020;吉林省长春市科技发展计划项目04-02GG217

在线出版日期：2008-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1136-1138