磷脂酰肌醇3激酶对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡和转化生长因子β1表达的影响

摘要：

目的 探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3-K)对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)增殖、凋亡和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.方法 以肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及PI3-K特异性抑制剂wortmannin作为工具药,分别将TNF-α、TNF-α+wortmannin接种ASMC,置37℃,5%CO2培养箱中培养.逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测PI3-Kp85α、TGF-β1 mRNA表达,免疫细胞化学染色法检测PI3-Kp85α、PCNA、Bcl-2蛋白表达及定位,Sandwich ELISA检测NF-κB活性,四甲基偶氮唑蓝(MTT)微量比色法测定ASMC增殖,AnnexinV/PI双标记流式细胞仪分析法检测细胞凋亡,ELISA测定TGF-β1蛋白质含量.结果 (1)培养的ASMC PI3-K p85α的阳性定位在胞浆.TNF-α组ASMC PI3-Kp85α mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组及TNF-α+wortmannin组(P＜0.01);(2)TNF-α组ASMCNF-κB活性与对照组相比显著增高(P＜0.01),TNF-α+wortmannin组NF-κB活性与TNF-α组相比显著降低(P＜0.01);(3)TNF-α组ASMC的增殖反应与对照组及TNF-α+wortmannin组相比显著增加(P＜0.01);TNF-α组细胞凋亡率与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05),TNF-α+wortmannin组细胞凋亡率显著高于TNF-α组及对照组(P＜0.01).(4)TNF-α组ASMC的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著高于对照组及TNF-α+wortmannin组(P＜0.01);(5)TNF-α组ASMC的TGF-β1的mRNA表达水平、培养液上清TGF-β1的蛋白质含量均显著高于对照组及TNF-α+wortmannin组(P＜0.01).结论 PI3-K可能参与调控TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞的增殖、凋亡及TGF-β1的表达和分泌,NF-κB作为PI3-K的下游信号参与此过程.

关键词：气道平滑肌细胞、磷脂酰肌醇3激酶、核因子-κB、增殖、凋亡、转化生长因子β1

所属期刊栏目：26

分类号：R3(基础医学)

资助基金：广西高校百名中青年学科带头人项目桂教人200564号;广西高校病理学科人才小高地创新团队计划项目桂教人200581号

在线出版日期：2006-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：883-889