诱导细胞凋亡的抗hDR5单抗的研究

摘要：

目的研制能诱导肿瘤细胞凋亡的抗人DR5单克隆抗体(McAb).方法以可溶性人死亡受体(death receptor,DR)5胞外段免疫小鼠,采用杂交瘤技术制备抗人DR5的McAb;MTT方法筛选分泌有细胞毒活性McAb的杂交瘤细胞;亲和层析方法纯化McAb;夹心ELISA法测定McAb亚型;Western blot和斑点ELISA法检测McAb的抗原表位类型;间接ELISA法检测McAb的特异性;流式细胞仪检测FITC-annexinV/PI双色标记的Jurkat细胞的凋亡率;DNA琼脂糖凝胶电泳测定凋亡细胞的DNA片段化.结果获得1株杂交瘤细胞,其分泌的McAb命名为mDRA-6,为IgG1;其抗原表位类型为构象表位;其特异性识别hDR5,与hFas、hDR4等无交叉反应.mDRA-6对Jurkat细胞具有细胞毒作用;经McAb mDRA-6处理后,Jurkat细胞膜表面高表达丝氨酸磷脂,并导致Jurkat细胞中的DNA片段化.结论mDRA-6是一个具有诱导细胞凋亡活性的新的抗人DR5功能性抗体,在以TRAIL/DR5系统进行肿瘤治疗和探讨DR5的功能结构域研究方面具有广泛应用前景.

关键词：死亡受体5、细胞凋亡、单克隆抗体

所属期刊栏目：26

分类号：R3(基础医学)

资助基金：河南省高校杰出科研创新人才工程项目0321001800;河南省医学科技人才创新工程项目2002119

在线出版日期：2006-08-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：632-636