超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素基因B的原核表达

摘要：

目的构建重组pET-30a-SEB原核表达载体,转化感受态大肠杆菌BL-21(DE3),诱导表达超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB).方法利用PCR技术从产SEB的金黄色葡萄球菌标准菌株CMCC-26075基因组DNA中克隆SEB全长序列,将其克隆到pGEM-T Easy载体中并进行测序.构建pET-30a-SEB原核表达质粒,转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),异丙基硫代β-D半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达,经镍离子螯合亲和层析纯化后免疫鉴定.结果PCR获得超抗原SEB基因片段,与克隆载体连接后经测序与文献报道的基本一致;成功构建了pET-30a-SEB原核表达质粒且成功诱导表达出相对分子质量(Mr)约31×103的蛋白.结论成功克隆了seb基因序列,并进行了原核表达和签定,获得了SEB蛋白,为后续对超抗原SEB的进一步研究奠定了基础.

关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B、超抗原、基因克隆、原核表达、PCR免疫印迹

所属期刊栏目：26

分类号：R37(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2006-06-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：418-421