实时PCR检测HSV-2的方法学建立

摘要：

目的建立一种快速、特异、准确定量的单纯疱疹病毒2型(HSV-2)检测方法.方法构建重组质粒pMD18-T-gG作为标准品.以HSV-2的gC基因区为靶基因区,设计合成引物和探针,采用TaqMan MGB技术对HSV-2进行实时定量PGR检测,优化反应体系,并进行方法学评价.结果成功构建重组质粒pMD18-T-gG.建立利用TaqMan MGB技术的real-time PGR方法,其重复性较好[批内CV(变异系数)值为2.29%,批间CV值为4.76%]、特异性较好(对HSV-1、Veto细胞、巨细胞病毒、弓形虫等无特异性扩增)、线性范围好(4.75×101～4.75×106 copies/μl,r=0.998),灵敏度达到47.5 copies/μl;与ELISA法进行比较,认为前者的灵敏度更高、检测时间更短.结论建立的TaqMan MGB PGR方法能够快速准确、特异、灵敏地对HSV-2进行定量分析,可为临床诊断提供帮助.

关键词：实时定量PCB、单纯疱疹病毒2型、生殖器疱疹

所属期刊栏目：26

分类号：R392

资助基金：广西南宁市科技局科研项目南科[2003]27号

在线出版日期：2006-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：375-378