HBV感染HepG2细胞早期过程研究

摘要：

目的探讨HBV吸附穿入HepG2细胞的方式,明确HBV难以自然感染细胞系的受限因素,为建立HBV自然感染细胞模型奠定基础. 方法在4℃和37℃条件下,HBV吸附HepG2细胞,用PCR方法检测胰酶消化液和细胞内的病毒DNA.另一部分HepG2细胞经过低温同步化处理,接种HBV后,于不同时相分别收集细胞和培养上清液,其中部分细胞进行核浆分离,通过间接免疫荧光、ELISA和PCR方法分别检测其中的病毒抗原和DNA,并且通过选择性PCR检测HepG2细胞HBV cccDNA. 结果在4℃条件下,HBV只是吸附于HepG2细胞膜表面.37℃条件下,部分吸附于HepG2细胞表面的病毒颗粒发生穿入,进入细胞浆,HepG2细胞和胰酶溶液中均可检出HBV DNA.接种病毒后4h、8h、24h HepG2细胞HBV DNA均呈阳性,至48h转为弱阳性,而96h为阴性.各时相上清液HBV DNA和病毒抗原均为阴性.HBV穿入HepG2细胞后,首先主要分布于胞浆中,随后出现胞核聚集性,胞浆中的病毒逐渐减少直至消失(感染后24h),而胞核中的病毒数量早期逐渐增加,从48h开始呈下降趋势,至96h消失.病毒接种后8h核膜与核浆中均可检出病毒DNA.各时相cccDNA检测始终阴性. 结论 HBV可能以"共受体"模式感染靶细胞.病毒脱衣壳过程受阻可能是HepG2细胞不支持HBV复制型感染的主要受限因素.

关键词：乙型肝炎病毒、HepG2细胞、感染、聚合酶链反应

所属期刊栏目：25

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2005-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：338-342